[發明專利]基于雙鏈DNA肽連接酶的JAK1基因特定突變檢測試劑盒及方法有效
| 申請號： | 202010109655.8 | 申請日： | 2020-02-22 |
| 公開（公告）號： | CN111088363B | 公開（公告）日： | 2022-08-16 |
| 發明（設計）人： | 黃志玲;黃種山;其他發明人請求不公開姓名 | 申請（專利權）人： | 黃志清 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6869;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 362300 福建省泉州市南*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 dna 連接酶 jak1 基因 特定 突變 檢測 試劑盒 方法 | ||
1.一種JAK1基因g.[227149insA]突變的檢測試劑盒，其特征在于試劑盒包括：（1）dDPlaseII連接酶，dDPlaseII連接酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，對應的基因編碼序列如SEQ ID NO：2所示；（2）dDPlaseII連接酶緩沖液，pH為7.8，由450mM Tris-Hcl、100mMMg2+、80mM NaCl、20mM ATP和8mM Triton X-100組成，每1μl反應體系中添加0.1μl的連接酶緩沖液；（3）RNase H酶及其配套的緩沖液，采用美國Thermo Fisher公司產品；（4）磁載多肽Ps，即包被多肽Ps的鏈霉親和素磁珠，其中多肽Ps的氨基酸序列為N’-EAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGAGMANCEHL-C’，其N端氨基酸E已經經過生物素修飾；（5）RNA引物Pr，其序列為5’-AGUUUGUGGAAGGGGGUCCU-3’；（6）DNA引物Pn，其序列為5’-CTGAACAGCTGACCCATGGT-3’；（7）DNA片段Pd，其序列為5’-AGGACCCCCTTCCACAAACT-3’；和（8）DNA引物Pm，其序列為5’-CTGGATCATCTTCATGCAC-3’；所述JAK1基因g.[227149insA]突變是以NCBI登錄號為NG_023402.2的JAK1野生型基因作為參考序列的。
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