[發明專利]一種多功能細胞-蛋白檢測方法及檢測裝置

在審

• 申請號: 202010108655.6
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN113295599A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 陶靖
• 申請（專利權）人: 上海納衍生物科技有限公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 楊宏泰

本發明涉及一種多功能細胞?蛋白檢測方法及檢測裝置，該方法應用流式熒光分析技術，對待測樣本集成實現血液細胞分析、基于微球的蛋白分子分析和細胞特征抗原分子分析；并且，血液細胞分析為基于微球的蛋白分子分析和細胞特征抗原分子分析提供基礎數據，用于檢測結果的校正和樣品反應的優化。與現有技術相比，本發明具有多功能一體化、全血樣本快速檢測、檢測結果準確校正和反應優化等優點。

技術領域

本發明涉及生物分析檢測領域，尤其是涉及一種多功能細胞-蛋白檢測方法及檢測裝置。

背景技術

在臨床疾病診斷中，血液細胞分析、可溶性蛋白分子分析、細胞特征抗原分子分析是常用的檢測項目，它們分別從不同角度提供了重要的診斷信息。

隨著醫學的進步和診斷水平的提高，對于很多疾病的診斷，需要結合多種檢測結果進行綜合判斷。例如，感染炎癥需要檢測白細胞分類計數和CRP、PCT等特征蛋白數量，免疫系統疾病需要檢測白細胞分類計數、細胞表面特征抗原CD4細胞絕對計數和某些特征蛋白數量。

現在，血液細胞分析通常在全自動血液細胞分析儀上進行檢測；細胞特征抗原分子分析通常在流式細胞分析儀上進行檢測；可溶性蛋白分子分析通常在生化分析儀、化學發光分析儀或特定蛋白分析儀等裝置上進行檢測，三種檢測項目分別在不同的儀器上進行檢測，由于這些檢測項目是在單獨的裝置上分別進行的，這樣需要消耗的樣本量大，檢測的時間長。

目前臨床上大量使用的可溶性蛋白分子分析通常使用血清或血漿樣品，在生化分析儀、化學發光分析儀等裝置上進行檢測，但制備血清或血漿，需要凝血和離心操作，消耗很多時間和人力。

針對急性病癥，特征蛋白的快速檢測使用全血樣本，如特定蛋白分析儀，但特定蛋白分析儀通常使用免疫比濁法，如免疫透射或免疫散射比濁法，由于檢測原理的限制，比濁法的檢測靈敏度和精密度都不高。

在免疫血清學檢測中，如生化免疫分析和化學發光免疫分析，原始全血樣本需先進行靜置和離心處理，分離血漿和血細胞，因此待測樣本中不包含血細胞，檢測得出的結果則是待測目標物數量/uL血清。

若使用全血樣本檢測可溶性蛋白分子，得出的結果是待測目標物數量/uL全血，這樣與免疫血清學檢測的結果不能對等比較，因此必須用血細胞的體積信息對全血樣本的檢測結果進行校正。血細胞占全血樣本的體積比例稱為細胞壓積，如圖11所示，通常細胞壓積為40-50％，但嬰幼兒的細胞壓積變化很大，有的可達70％。現在使用原始全血樣本進行免疫分析的儀器，通常使用40％作為缺省值進行血細胞體積校正，這樣有很大誤差。為得到血細胞體積的精確信息，還需另外使用血液細胞分析儀獲得細胞壓積數據。

目前在臨床診斷中，細胞特征抗原CD4細胞絕對計數分析是免疫系統疾病檢測的核心判斷指標。細胞特征抗原分析，通常使用流式細胞分析儀進行檢測，只能給出特征抗原細胞的比例信息，如CD4細胞占整個淋巴細胞的百分比，而不能給出CD4細胞的絕對數量(個數/uL全血樣本)。通常為得到白細胞或淋巴細胞的絕對數量信息，則需要另外使用血液細胞分析儀檢測得到。

細胞特征抗原分析中，抗原與抗體進行特異性結合反應。為了達到最佳的信噪比，加入的抗體數量有一個最優的比例范圍，優選地，樣本的白細胞計數應小于10.0*10^9/L，若白細胞計數10.0*10^9/L，樣本需要進行稀釋，通常為得到白細胞或淋巴細胞的絕對數量信息，需要另外使用血液細胞分析儀。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種多功能細胞-蛋白檢測方法及檢測裝置。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種多功能細胞-蛋白檢測方法，應用流式熒光分析技術，對待測樣本集成實現血液細胞分析、基于微球的蛋白分子分析和細胞特征抗原分子分析；