[發明專利]一種新型冠狀肺炎病毒快速檢測試紙條及其應用

有效

• 申請號: 202010107401.2
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111273026B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 陸培華;鄒健;陳衛東
• 申請（專利權）人: 無錫市人民醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 國浩律師(南京)事務所 32284
• 代理人: 耿欣

本發明公開了一種新型冠狀肺炎病毒快速檢測試紙條及其應用，屬于生物技術檢測領域。具體地，新型冠狀肺炎病毒先與ACE2受體活性的固相化的類N95膜結合，形成ACE2受體和病毒固相化結合物，通過加病毒RNA序列互補的特異性探針，形成ACE2受體?病毒?探針的三分子復合物，由于探針上標記顯色試劑，顯色即病毒陽性，不顯色即為病毒陰性法。本發明具有簡單快速、無需抽血、可以實現居家或現場檢測、特異靈敏、無需輔助試劑和儀器、肉眼觀察結果等特點，成為當今最快速簡便的新型冠狀肺炎病毒的檢測技術。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及一種新型冠狀肺炎病毒快速檢測試紙條及其應用。

背景技術

新型冠狀肺炎病毒冠狀病毒為不分節段的單股正鏈RNA病毒，屬于巢病毒目(Nidovirales)冠狀病毒科(Coronaviridae)正冠狀病毒亞科(Orthocoronavirinae)，根據血清型和基因組特點冠狀病毒亞科被分為α、β、γ和δ四個屬。已知感染人的冠狀病毒有6種，包括α屬的229E和NL63，β屬的OC43和HKU1、中東呼吸綜合征相關冠狀病毒(MERSr-CoV)和嚴重急性呼吸綜合征相關冠狀病毒(SARSr-CoV)。此次從武漢市不明原因肺炎患者下呼吸道分離出的冠狀病毒為一種屬于β屬的新型冠狀肺炎病毒。

冠狀病毒有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，經常為多形性，直徑50～200nm。S蛋白位于病毒表面形成棒狀結構，作為病毒的主要抗原蛋白之一，是用于分型的主要基因。N蛋白包裹病毒基因組，可用作診斷抗原。對冠狀病毒理化特性的認識多來自對SARS-CoV和MERS-CoV的研究。病毒可經空氣飛沫等途徑傳播，具高致病性，可引起死亡，目前沒有有效的治療藥物，主要通過早期診斷及對癥治療的方式。臨床發現患者早期沒有明顯癥狀或者發熱現象，但此時患者傳播力極強，因此出現了后來的新型冠狀肺炎病毒的早期診斷方法。

新型冠狀肺炎病毒的早期診斷方法較多，主要涉及血清學、分子生物學領域，比較常用的有RT-PCR核酸分子檢測和血清IgM抗體ELISA檢測等方法，但這些方法均存在一定的缺陷：

RT-PCR核酸分子檢測是新型冠狀肺炎病毒早期檢測方法中靈敏度最高的方法，通過檢測患者咽喉部拭子病毒判斷感染情況，需要專業的技術人員和昂貴的熒光PCR擴增儀，基層醫療部門比較難開展該診斷方法。另外，在采集患者咽喉部細胞時，較容易引起患者不適造成反嘔或者嘔吐發生，給醫務人員工作增加困難，同時也容易增加采樣室病毒污染的風險。最后，新型冠狀肺炎病毒主要在下呼吸道，采集患者咽喉部細胞存在較高的假陰性，甚至有報道7次咽喉部拭子核酸檢測陰性，第8次變為陽性的報道。

血清學IgM/IgG抗體ELISA檢測主要通過檢測血清中新型冠狀肺炎病毒IgM抗體了解患者近期感染病毒的情況，但需要抽血完成，且IgM/IgG一般在感染2周后才出現，不利于早期診斷，且給臨床醫護人員操作帶來一定的難度。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種新型冠狀肺炎病毒快速檢測試紙條，用以實現新型冠狀肺炎病毒的現場快速檢測。

本發明的第二目的在于提供一種新型冠狀肺炎病毒快速檢測試紙條在新型冠狀肺炎病毒快速檢測中的應用，具有簡單快速、無需抽血、可以實現居家或現場檢測、特異靈敏、無需輔助試劑和儀器、肉眼觀察結果等特點。

為了實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案：

一種新型冠狀肺炎病毒快速檢測試紙條，包括：固相化結合膜、用于檢測新型冠狀肺炎病毒的特異性探針和緩沖液；

所述固相化結合膜為熔噴聚丙烯膜，在熔噴聚丙烯膜上負載有ACE2受體蛋白。

進一步地，所述用于檢測新型冠狀肺炎病毒的特異性探針序列為用于檢測新型冠狀肺炎病毒的ORF1ab基因的熒光探針或用于檢測新型冠狀肺炎病毒的N基因的熒光探針。

進一步地，所述用于檢測新型冠狀肺炎病毒的ORF1ab基因的熒光探針序列為：