[發明專利]一種花葉矮蒲葦組織培養的培養方法

有效

• 申請號: 202010096609.9
• 申請日: 2020-02-18
• 公開（公告）號: CN111084108B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 周敬鋒;李懿瑋;韋俊宇
• 申請（專利權）人: 美尚生態景觀股份有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;A01G24/28;A01G24/15
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 朱建均

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體涉及一種花葉矮蒲葦組織培養的培養方法。本發明花葉矮蒲葦組織培養的培養方法包括以下步驟：外植體的選擇、外植體的消毒滅菌、芽誘導培養、繼代培養、生根培養和移栽煉苗。本方法結合了花葉矮蒲葦的生長特點，通過選擇合適的消毒方式、培養基和煉苗方式，采用高、低濃度激素交替增殖，減少玻璃化的同時能有效提高增殖系數，在增殖培養時能夠解決高濃度激素導致的玻璃化嚴重的問題，煉苗方式簡單、新穎、高效，能大大降低生產成本，能在一定時間內高效經濟地獲取大量優良花葉矮蒲葦組培苗，具有廣泛的市場應用前景。

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體公開了一種花葉矮蒲葦組織培養的培養方法。

技術背景

花葉矮蒲葦是多年生草本植物，株高120cm，葉聚生于基部，長而狹，邊有細齒，圓錐花序大，羽毛狀，銀白色，國外著名的觀賞草，用于園林綠化或岸邊栽植。陽性，喜陽光充足、溫暖濕潤環境，亦耐寒；適應性強，不擇土壤，既耐水濕，亦耐干旱，現在市場上需求量很大，目前國內關于花葉矮蒲葦組織培養研究的報道很多，但是存在增殖比例不穩定，遺傳不穩定，擴繁轉接時葉子長操作難，煉苗清洗難、栽植難以及生產成本高等缺點。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于針對上述現有技術的不足，提供了一種花葉矮蒲葦組織培養的培養方法。本發明采用高、低濃度激素交替增殖，高增殖比例擴繁，能夠提高繁殖速度和苗的整齊度，并提高性狀穩定性，從而建立更適合花葉矮蒲葦快速繁殖的工廠化生產體系。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種花葉矮蒲葦組織培養的培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）外植體的選擇和消毒滅菌：選取生長健壯且無病蟲的花葉矮蒲葦植株，選取新長出的嫩芽為外植體，去除外植體多余莖段和包裹的葉片，并洗去附著的碎葉和雜質，將處理完的外植體放入混有1~2滴吐溫的質量分數為0.08%~0.12%的升汞溶液中，消毒7~9分鐘，取出用無菌水沖洗4~6次，切除褐變部分，將外植體切割成2~3cm小段，接種到初代培養基上培養5~7天，所述初代培養基為含有蔗糖和瓊脂粉的1/2MS培養基；

（2）芽誘導培養：從初代培養基中選取無污染外植體，將其接種到誘導培養基上，7~15天形成不定芽，再培養15~25天后不定芽增高到2~3cm，所述誘導培養基為含有0.5~1.5mg/L的6-BA、0.4~0.6mg/L的2, 4-D、蔗糖和瓊脂的MS培養基；

（3）增殖培養：將步驟（2）中經芽誘導培養后的不定芽接種到增殖培養基上，所述增殖培養基為含有高濃度激素6-BA或低濃度激素6-BA、蔗糖和瓊脂的MS培養基；

（4）生根培養：將增殖培養后的苗分成單株接入生根培養基中繼續培養，所述培養基為含有0~1.0 mg/L的IBA、蔗糖和瓊脂的1/4MS培養基；

（5）煉苗：將在生根培養基上培養25~30天的苗取出，去除根部，洗去培養基，置于多菌靈溶液浸泡2~3分鐘，洗凈栽種在泥炭和珍珠巖的混合基質中，栽種完成放入大棚內，保持溫度在15~25℃，濕度在65%以上。

所述步驟（3）中，整個增殖培養過程中高濃度激素6-BA2.0~3.0mg/L、低濃度激素6-BA0.2~0.4mg/L交替使用，擴繁增殖系數控制在8以上。

所述步驟（4）中，生根培養時7~15天苗長出根原基，15~25天根長3~4cm，生根率95%~100%。

所述步驟（2）-（4）中，所述腋芽誘導培養基、增殖培養基和生根培養基中蔗糖20~30g/L、瓊脂粉5~7g/L，培養基的pH為5.8~6.2。

所述步驟（2）-（4）中，芽誘導、增殖、生根培養過程中，培養環境溫度24~26℃，光照1500~2500lx。

所述步驟（5）中煉苗時混合基質泥炭和珍珠巖的比例為3:0.5~2。