[發(fā)明專利]一種花葉矮蒲葦組織培養(yǎng)的培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010096609.9
• 申請(qǐng)日: 2020-02-18
• 公開（公告）號(hào): CN111084108B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周敬鋒;李懿瑋;韋俊宇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 美尚生態(tài)景觀股份有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01G31/00;A01G24/28;A01G24/15
• 代理公司: 無(wú)錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32104
• 代理人: 朱建均

1.一種花葉矮蒲葦組織培養(yǎng)的培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）外植體的選擇和消毒滅菌：選取生長(zhǎng)健壯且無(wú)病蟲的花葉矮蒲葦植株，選取新長(zhǎng)出的嫩芽為外植體，去除外植體多余莖段和包裹的葉片，并洗去附著的碎葉和雜質(zhì)，將處理完的外植體放入混有1~2滴吐溫的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.08%~0.12%的升汞溶液中，消毒7~9分鐘，取出用無(wú)菌水沖洗4~6次，切除褐變部分，將外植體切割成2~3cm小段，接種到初代培養(yǎng)基上培養(yǎng)5~7天，所述初代培養(yǎng)基為含有蔗糖和瓊脂粉的1/2MS培養(yǎng)基；

（2）芽誘導(dǎo)培養(yǎng)：從初代培養(yǎng)基中選取無(wú)污染外植體，將其接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，7~15天形成不定芽，再培養(yǎng)15~25天后不定芽增高到2~3cm，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為含有0.5~1.5mg/L的6-BA、0.4~0.6mg/L的2， 4-D、蔗糖和瓊脂的MS培養(yǎng)基；

（3）增殖培養(yǎng)：將步驟（2）中經(jīng)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)后的不定芽接種到增殖培養(yǎng)基上，所述增殖培養(yǎng)基為含有高濃度激素6-BA或低濃度激素6-BA、蔗糖和瓊脂的MS培養(yǎng)基，整個(gè)增殖培養(yǎng)過(guò)程中高濃度激素6-BA2.0~3.0mg/L、低濃度激素6-BA0.2~0.4mg/L交替使用，擴(kuò)繁增殖系數(shù)控制在8以上；

（4）生根培養(yǎng)：將增殖培養(yǎng)后的苗分成單株接入生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基為含有0~1.0 mg/L的IBA、蔗糖和瓊脂的1/4MS培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)時(shí)7~15天苗長(zhǎng)出根原基，15~25天根長(zhǎng)3~4cm，生根率95%~100%；

（5）煉苗：將在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)25~30天的苗取出，去除根部，洗去培養(yǎng)基，置于多菌靈溶液浸泡2~3分鐘，洗凈栽種在泥炭和珍珠巖的混合基質(zhì)中，栽種完成放入大棚內(nèi)，保持溫度在15~25℃，濕度在65%以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花葉矮蒲葦組織培養(yǎng)的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟（2）-（4）中，所述腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基中蔗糖20~30g/L、瓊脂粉5~7g/L，培養(yǎng)基的pH為5.8~6.2。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花葉矮蒲葦組織培養(yǎng)的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟（2）-（4）中，芽誘導(dǎo)、增殖、生根培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)環(huán)境溫度24~26℃，光照1500~2500lx。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花葉矮蒲葦組織培養(yǎng)的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟（5）中煉苗時(shí)混合基質(zhì)泥炭和珍珠巖的比例為3:0.5~2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花葉矮蒲葦組織培養(yǎng)的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟（5）中煉苗時(shí)，移栽完成后從早8點(diǎn)至晚6點(diǎn)每半小時(shí)澆水10~15秒，保持苗木土壤濕潤(rùn)，持續(xù)6~8天，一周后撤去遮陽(yáng)網(wǎng)，每天澆水一次，持續(xù)8~12分鐘，通風(fēng)一次。