[發(fā)明專(zhuān)利]基于共振能量轉(zhuǎn)移的電化學(xué)發(fā)光傳感器及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010096082.X
• 申請(qǐng)日: 2020-02-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111198221B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李靜嫻;單學(xué)凌;蔣鼎;陳智棟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 常州大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N27/30
• 分類(lèi)號(hào): G01N27/30;G01N27/327;G01N21/76
• 代理公司: 常州市英諾創(chuàng)信專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 32258
• 代理人: 王美華

1.一種基于共振能量轉(zhuǎn)移的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于：包括作為能量共振轉(zhuǎn)移中的供體的PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料、作為能量共振轉(zhuǎn)移中的受體的Au NPs，所述PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料和 AuNPs之間通過(guò)三條DNA鏈連接并共同修飾在玻碳電極上，其中一條DNA鏈連接供體，另一條DNA鏈連接受體，第三條DNA鏈為適配體，所述適配體用于將連接供體的DNA鏈和連接受體的DNA鏈連接；所述PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料是由PTCA固定NH₂-MIL-125而得；

PTCA為苝四羧酸，PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料的獲得方法為：將NH₂-MIL-125和制得的PTCA加入有機(jī)溶劑中，超聲分散均勻后，再在磁力攪拌器中攪拌，攪拌完成后，離心分離并分別用有機(jī)溶劑和去離子水洗滌，再經(jīng)干燥制得淡紅色粉末，即PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料，并將PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料分散在DMF中以備使用；

PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料修飾在電極表面。

2.如權(quán)利要求1所述的基于共振能量轉(zhuǎn)移的電化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料的制備：

將苝四羧酸二酐溶于NaOH，并劇烈攪拌，得到黃綠色溶液后，滴入HCl直至完全沉淀，離心并用去離子水洗滌三次，干燥得到暗紅色粉末，即PTCA；

將NH₂-MIL-125和制得的PTCA加入有機(jī)溶劑中，超聲分散均勻后，再在磁力攪拌器中攪拌，攪拌完成后，離心分離并分別用有機(jī)溶劑和去離子水洗滌，再經(jīng)干燥制得淡紅色粉末，即PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料，并將PTCA/NH₂-MIL-125復(fù)合材料分散在DMF中以備使用；

（2）AuNPs/DNA2膠體溶液的制備:

將含有DNA2的Tris-HCl溶液加入體積含量為50%的AuNPs水溶液中，靜置反應(yīng)后，離心并取沉淀加入Tris-HCl，控制pH為7.5，經(jīng)超聲處理，并在室溫下震蕩，制得AuNPs/DNA2膠體溶液，AuNPs/DNA2膠體溶液于4℃下儲(chǔ)存?zhèn)溆茫凰鯠NA2為所述的用于連接受體的DNA鏈；

（3）基于共振能量轉(zhuǎn)移的電化學(xué)發(fā)光傳感器的制備：

將含有NHS和EDC的PBS緩沖液涂滴在干凈的裸玻碳電極上，至少1小時(shí)后，獲得活化的玻碳電極，隨后，將步驟（1）制得的所述PTCA/NH₂-MIL-125 復(fù)合材料的DMF分散液滴加在活化的玻碳電極上，得到PTCA/NH₂-MIL-125/GCE修飾電極；然后，再涂滴含有NHS和EDC的PBS緩沖液于PTCA/NH₂-MIL-125/GCE修飾電極上，活化PTCA中的羧基；最后，依次滴涂含有DNA1的Tris-HCl溶液、適配體的Tris-HCl溶液和AuNPs/DNA2膠體溶液，得到所述基于共振能量轉(zhuǎn)移的電化學(xué)發(fā)光傳感器；所述DNA1為所述的用于連接供體的DNA鏈。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于共振能量轉(zhuǎn)移的電化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于：步驟（1）中NH_2-MIL-125 與PTCA質(zhì)量比為0.3~3:1， NH_2-MIL-125和PTCA的總濃度為0.5~1mg/ml；PTCA/NH₂-MIL-125的涂滴量為1.0~2.5μL；適配體的涂滴量為2.0μL，濃度為1.0~2.5μmol/L。