[發明專利]番茄果實發育相關基因的功能性分子標記的應用

有效

• 申請號: 202010089679.1
• 申請日: 2020-02-12
• 公開（公告）號: CN111187853B
• 公開（公告）日: 2023-03-03
• 發明（設計）人: 張永夏;朱小恩;黃騰波
• 申請（專利權）人: 深圳大學;深圳大學龍華生物產業創新研究院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414
• 代理人: 黃志云

本發明通過應用所述的番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物Sly_miRNA164b，進而對番茄果實發育相關基因進行表達，通過GUS染色技術即可快速驗證植株果實的發育狀態，操作簡單易行，實驗結果可靠；同時通過功能性分子標記分析得到Sly_miRNA164b與番茄果實形狀和成熟的相關性，能夠快速、準確、高效地鑒定番茄果實的形狀和成熟，為番茄的篩選提供了依據，同時也為種質資源鑒定中分子標記提供了重要的途徑。

技術領域

本發明涉及分子生物學領域，尤其涉及一種番茄果實發育相關基因的功能性分子標記的應用。

背景技術

番茄(Solanum lycopersicum)屬于茄科植物，是一種含有豐富的碳水化合物、有機酸、維生素和礦物質等漿果，也是人類重要的食物和營養來源。

番茄是一種喜溫性的蔬菜，在正常條件下，同化作用最適溫度為20-25℃，根系生長最適土溫為20-22℃。喜光，光飽和點為70000lx，適宜光照強度為30000-50000lx。也是短日照植物，番茄喜水，一般以土壤濕度60-80％、空氣濕度45-50％為宜。

番茄果實在成熟過程中可分為4個時期，即綠熟期(MG)、破色期(Br)、和成熟期(Ri)。(1)綠熟期。果實已充分膨大，但果皮全是青綠色，果肉堅硬，風味較差。為儲藏或遠距離運輸時采收適期。(2)破色期。果實的頂端開始由青變黃白色，果肉開始變軟，含糖量增高。為就近供應或短距離運輸時采收適期。(3)成熟期。果實表面全部變紅，果肉變軟，含糖量達最高。

MicroRNA(miRNA)是一類單鏈、長度約為20-24nt的內源性非編碼的小RNA，能夠通過與靶基因的mRNA特異性的堿基配對引起其mRNA的降解或者抑制其翻譯，從而對基因表達進行轉錄后調控。miRNA在植物生長與發育中發揮著重要的調控作用，同時miRNA對番茄果實發育與成熟過程中也有一定的調控作用。因此對番茄果實發育與成熟的相關基因功能性分子標記進行研究，有利于探討番茄果實發育與成熟的調控機制。

發明內容

本發明的目的在于提供一種番茄果實發育相關基因的功能性分子標記的應用，旨在解決現有技術中無法準確對番茄果實的發育和成熟進行調控的問題。

為實現上述發明目的，本發明采用的技術方案如下：

一種番茄果實發育相關基因的功能性分子標記在調節番茄果實發育的應用；其中，所述番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物為Sly_miR164b，所述Sly_miRNA164b的啟動子基因序列proMIR164b如SEQ ID NO.1所示。

一種引物對，所述引物對用于擴增表達番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物，所述功能性分子標記物為Sly_miRNA164b，且所述引物對包括與proMIR164b結合的上游引物和與所述proMIR164b結合的下游引物；其中，所述上游引物的序列如SEQ ID NO.2所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO.3所示。

一種用于表達番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物的試劑盒，所述試劑盒包括所述的引物對。

本發明通過應用所述的番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物Sly_miRNA164b，進而對番茄果實發育相關基因進行表達，通過GUS染色技術即可快速驗證植株果實的發育狀態，操作簡單易行，實驗結果可靠；同時通過功能性分子標記分析得到Sly_miRNA164b與番茄果實形狀與成熟的相關性，能夠快速、準確、高效地鑒定番茄果實的形狀和成熟，為番茄的篩選提供了依據，同時也為種質資源鑒定中分子標記提供了重要的途徑。

本發明所述的的番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物Sly_miRNA164b，能夠應用于分子改造中，通過對番茄果實發育相關基因的功能性分子標記物Sly_miRNA164b進行突變，進而對番茄進行分子改造，控制番茄的成熟時間。