[發(fā)明專利]一種測定肉中瓜爾膠的分析方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010080374.4
• 申請日: 2020-02-05
• 公開（公告）號: CN111239279B
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李慧娟;陳相峰;謝含儀;趙燕芳;趙梅
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省分析測試中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 北京卓恒知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11394
• 代理人: 唐曙暉

本發(fā)明涉及一種測定肉中瓜爾膠的分析方法，采用三氟乙酸對添加瓜爾膠的畜肉進行降解；然后通過高分辨率質(zhì)譜對水解液掃描，并結(jié)合空白畜肉結(jié)果，進行差異組分查找，確定瓜爾膠水解后的特征標(biāo)志物離子；在此基礎(chǔ)上，進一步的利用串聯(lián)質(zhì)譜，獲得特征標(biāo)志物離子的多重反應(yīng)監(jiān)測定性和定量的離子對，完成基于高效液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜的瓜爾膠分析方法的建立。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種測定肉中瓜爾膠的分析方法，屬于食品安全和食品分析檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

瓜爾膠是從瓜爾豆中提取的一種天然的多糖，其主鏈由(1-4)β-D-甘露糖為結(jié)構(gòu)單元連接，側(cè)鏈為α-D-半乳糖組成，通過(1-6)糖苷鍵與主鏈相接。作為一種廣泛使用的食品添加劑，瓜爾膠在肉制品中主要用作增稠劑、粘合劑和持水劑。因瓜爾膠價格低廉，近年來成為目前世界上最應(yīng)用廣泛的親水性膠體之一。由于肉價的不斷攀升，不法分子通過對牲畜屠宰前泵注或者生鮮肉直接注入的方式，制售含有瓜爾膠的畜鮮肉或者凍肉(“注膠肉”)。該行為不僅涉嫌行業(yè)欺詐，而且注膠肉可能會通過膠水引入致病微生物和外源性有害物質(zhì)污染，如防腐劑、重金屬、色素等。

目前國內(nèi)外關(guān)于瓜爾膠的注膠肉尚無相關(guān)的檢測標(biāo)準或者規(guī)范。雖然水分質(zhì)量分數(shù)在相關(guān)標(biāo)準中作為部分畜肉的判斷標(biāo)準之一，但是僅通過水分測定無法判斷注水肉與注膠肉。低場核磁共振技術(shù)可以提供肉中水分的存在狀態(tài)和分布方式，實現(xiàn)注膠成分的分段預(yù)測。近紅外光譜技術(shù)通過大樣本量實驗，結(jié)合主成分分析、判別分析、結(jié)合最小二乘法等化學(xué)計量學(xué)手段，可以實現(xiàn)注膠肉的判別。以上兩種方法雖然操作相對簡單，但是其結(jié)果的準確性嚴重的依賴于判別模型，其判定注入膠的參數(shù)不明確，無法作為定性和定量的依據(jù)在執(zhí)法檢測中應(yīng)用。

因此，急需建立畜禽肉中瓜爾膠的檢測方法，滿足檢測和執(zhí)法需求，遏制畜禽肉注瓜爾膠不法行為，保障食品安全。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供一種測定肉中瓜爾膠的分析方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一種測定肉中瓜爾膠的分析方法，包括以下步驟：

1)將待分析肉樣品研磨后用1.5～2.5mol/L的三氟乙酸水溶液在溫度75～85℃條件下降解25～35min，其中，樣品與三氟乙酸水溶液的投料比例為1g：1mL；降解結(jié)束后，冷卻，離心得到上清水解液；取上清水解液按照1:1～1.5體積比加入甲醇洗滌后在75℃條件下氮吹至干，重復(fù)數(shù)次直至pH為中性，用水復(fù)溶后，經(jīng)0.22μm水相濾膜過濾，得到待分析降解液；

2)基于高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對待分析降解液進行分析，選取粒徑為5.0μm，柱長為150mm，柱內(nèi)徑為2.1mm的HILIC柱作為色譜柱；其中，液相色譜條件為：

進樣量：10μL；

柱流速：0.5mL/min；

柱溫:30℃；

質(zhì)譜條件為：離子源：電噴霧離子源(ESI)；掃描方式：負離子模式；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測；毛細管溫度：300℃；毛細管電壓：-3500V；脫溶劑氣溫度：350℃；殼氣流速：50psi；輔助氣流速：30psi。

3)獲得特征標(biāo)志物離子的多重反應(yīng)監(jiān)測定性和定量的離子對，完成基于高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的瓜爾膠分析方法的建立。

按上述方案，在步驟1)中，所述降解在封閉反應(yīng)容器中進行并伴有渦旋。

按上述方案，在步驟2)中，還包括采用流動相進行洗脫以獲得更優(yōu)的分離效果，所述流動相由A相和B相組成，A相為水，B相為乙腈。