[發明專利]外泌體miR-181b-5p在食管鱗癌診斷和治療中的應用

在審

• 申請號: 202010075106.3
• 申請日: 2020-01-22
• 公開（公告）號: CN113151455A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 王穎;徐寒梅;陸繼強
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K45/00;A61P35/00;A61P35/04;A61P9/00;C12N15/113
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 彭鯤鵬;高巍

本發明涉及腫瘤外泌體miR?181b?5p及其應用，miR?181b?5p能夠在體內和體外促進腫瘤血管新生，誘導腫瘤的生長和轉移，臨床患者血清外泌體miR?181b?5p可用于食管鱗癌的診斷及預后評估，miR?181b?5p抑制劑可以作為抑制血管新生以及抑制食管鱗癌腫瘤生長、轉移和腫瘤血管新生的藥物。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體為腫瘤診斷和治療領域，特別涉及外泌體miR-181b-5p在食管鱗癌診斷和治療中的應用。

背景技術

食管癌是人類常見的惡性腫瘤之一，按照病理形態分類，食管癌主要有兩種分型：食管鱗癌(ESCC)和食管腺癌(EAC)，其中西方國家以食管腺癌為主，研究也主要集中在食管腺癌的發病機制和治療方面；而食管鱗癌則主要發生在中國等亞洲地區，在中國超過90％的食管癌為食管鱗癌。由于缺乏早期診斷方法和生物檢測指標，大多數食管癌患者在初次診斷時已經是中晚期，而且患者的5年總體生存率較低，因此尋找有效的早期診斷和預后標志物具有重大的意義。

腫瘤的發生與發展是多因素共同介導的，包括遺傳、環境、免疫和物質代謝等，其中腫瘤微環境對腫瘤的生長和轉移至關重要。腫瘤微環境中的多種細胞和非細胞組分，如免疫細胞、成纖維細胞、脈管系統等，癌細胞外的特殊局部環境均在腫瘤發展的過程中起到了十分重要的作用。基于臨床治療難以突破的現實問題，提示食管癌患者的治療不能局限于腫瘤本身，可以從靶向調節腫瘤微環境入手。腫瘤血管生成是腫瘤微環境形成的必要條件，亦是腫瘤微環境形成的特征之一。血管生成與腫瘤的發生發展、惡性增殖和轉移密切相關，靶向調節腫瘤微環境中血管生成過程是一種有效的抗癌治療策略。

外泌體是一種由多種細胞分泌的納米級胞外囊泡，直徑為30-100nm，形狀為“杯托狀”或者“盤狀”，由細胞內多囊泡體融合了細胞膜之后以胞吐的形式釋放到胞外。外泌體可以作為細胞間信息交流的新型載體，通過影響細胞間的信息交流參與多種生物學進程。外泌體中含有多種內容物，包括mRNA、miRNA、DNA、蛋白質和脂質等物質，在外泌體中發現超過3000多種的RNA，2700多種miRNA以及近千種脂類，這些內容物被外泌體運輸并作用于相應的靶細胞而發揮其生物學功能。腫瘤細胞分泌的外泌體攜帶了腫瘤細胞所具有的特殊信息并通過分泌外泌體的方式將有利于自身生長的信息傳遞給周圍的多種細胞和組織來促進腫瘤細胞的生長和轉移，其促進生長的機制主要包括：促進腫瘤血管新生、引起免疫逃逸、誘導腫瘤轉移、以及參與腫瘤耐藥等。

總之，外泌體作為腫瘤微環境中的一個重要組分，攜帶遺傳信息或蛋白質參與調控腫瘤細胞和血管內皮細胞間信號轉導，促進腫瘤血管生成和腫瘤惡化過程，對其進行深入的分子機制研究將為癌癥患者的臨床診斷和治療提供全新的思路。

發明內容

發明人經過多年的研究，鑒定獲得了一個與食管鱗癌的診斷和治療高度相關的miRNA——miR-181b-5p，該miRNA存在于食管鱗癌所分泌的外泌體中，高表達的miR-181b-5p能夠指示食管鱗癌的存在，而抑制miR-181b-5p的功能則能夠抑制食管鱗癌腫瘤生長和轉移或腫瘤血管新生，進而用于治療食管鱗癌。正是基于上述發現，完成了本發明。具體地，本發明至少包括如下技術方案：

本發明的第一個方面提供了miR-181b-5p在制備用于食管鱗癌診斷或預后評價的試劑、組合物或者試劑盒中的應用，優選地，所述miR-181b-5p的序列為AACAUUCAUUGCUGUCGGUGGGU(SEQ?ID?NO:1)。

本發明的第二個方面提供了miR-181b-5p的檢測試劑在制備用于食管鱗癌診斷或預后評價的試劑、組合物或者試劑盒中的應用，優選地，所述miR-181b-5p的序列為AACAUUCAUUGCUGUCGGUGGGU(SEQ?ID?NO:1)。

在一個實施方案中，所述檢測試劑用于檢測來自受試者的樣本中miR-181b-5p的表達水平，優選地，所述檢測試劑用于檢測來自受試者樣本的外泌體中miR-181b-5p的表達水平；還優選地，所述樣本為體液樣本，例如血液、血清、血漿、淚液、尿液、唾液、組織液、腦脊液或汗液。