[發(fā)明專利]竹柏和長(zhǎng)葉竹柏葉綠體基因組PCR擴(kuò)增引物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010069452.0
• 申請(qǐng)日: 2020-01-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111172312B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 祁浩然;楊春霞;胥猛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué);江西省林業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12Q1/6806;C12N15/11
• 代理公司: 南京申云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

1.竹柏和長(zhǎng)葉竹柏葉綠體基因組PCR擴(kuò)增引物在竹柏和長(zhǎng)葉竹柏葉綠體基因組PCR擴(kuò)增中的應(yīng)用，其特征在于，包括以下步驟：

1）提取竹柏或長(zhǎng)葉竹柏的總DNA或葉綠體基因組的DNA；

2）用所述的竹柏和長(zhǎng)葉竹柏葉綠體基因組PCR擴(kuò)增引物構(gòu)建PCR擴(kuò)增體系，對(duì)步驟1）提取的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

所述的竹柏和長(zhǎng)葉竹柏葉綠體基因組PCR擴(kuò)增引物包括29對(duì)引物，所述29對(duì)引物的核苷酸序列如下：

cp1正向引物如SEQ ID NO.1所示；cp1反向引物如SEQ ID NO.2所示；

cp2正向引物如SEQ ID NO.3所示；cp2反向引物如SEQ ID NO.4所示；

cp3正向引物如SEQ ID NO.5所示；cp3反向引物如SEQ ID NO.6所示；

cp4正向引物如SEQ ID NO.7所示；cp4反向引物如SEQ ID NO.8所示；

cp5正向引物如SEQ ID NO.9所示；cp5反向引物如SEQ ID NO.10所示；

cp6正向引物如SEQ ID NO.11所示；cp6反向引物如SEQ ID NO.12所示；

cp7正向引物如SEQ ID NO.13所示；cp7反向引物如SEQ ID NO.14所示；

cp8正向引物如SEQ ID NO.15所示；cp8反向引物如SEQ ID NO.16所示；

cp9正向引物如SEQ ID NO.17所示；cp9反向引物如SEQ ID NO.18所示；

cp10正向引物如SEQ ID NO.19所示；cp10反向引物如SEQ ID NO.20所示；

cp11正向引物如SEQ ID NO.21所示；cp11反向引物如SEQ ID NO.22所示；

cp12正向引物如SEQ ID NO.23所示；cp12反向引物如SEQ ID NO.24所示；

cp13正向引物如SEQ ID NO.25所示；cp13反向引物如SEQ ID NO.26所示；

cp14正向引物如SEQ ID NO.27所示；cp14反向引物如SEQ ID NO.28所示；

cp15正向引物如SEQ ID NO.29所示；cp15反向引物如SEQ ID NO.30所示；

cp16正向引物如SEQ ID NO.31所示；cp16反向引物如SEQ ID NO.32所示；

cp17正向引物如SEQ ID NO.33所示；cp17反向引物如SEQ ID NO.34所示；

cp18正向引物如SEQ ID NO.35所示；cp18反向引物如SEQ ID NO.36所示；

cp19正向引物如SEQ ID NO.37所示；cp19反向引物如SEQ ID NO.38所示；

cp20正向引物如SEQ ID NO.39所示；cp20反向引物如SEQ ID NO.40所示；

cp21正向引物如SEQ ID NO.41所示；cp21反向引物如SEQ ID NO.42所示；

cp22正向引物如SEQ ID NO.43所示；cp22反向引物如SEQ ID NO.44所示；

cp23正向引物如SEQ ID NO.45所示；cp23反向引物如SEQ ID NO.46所示；

cp24正向引物如SEQ ID NO.47所示；cp24反向引物如SEQ ID NO.48所示；

cp25正向引物如SEQ ID NO.49所示；cp25反向引物如SEQ ID NO.50所示；

cp26正向引物如SEQ ID NO.51所示；cp26反向引物如SEQ ID NO.52所示；

cp27正向引物如SEQ ID NO.53所示；cp27反向引物如SEQ ID NO.54所示；

cp28正向引物如SEQ ID NO.55所示；cp28反向引物如SEQ ID NO.56所示；

cp29正向引物如SEQ ID NO.57所示；cp29反向引物如SEQ ID NO.58所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增體系為：100 ng DNA，10μM 正向引物，10μM 反向引物，25 μL Primer STAR Max Premix(2×)，ddH₂O補(bǔ)至50 μL。