[發明專利]檢測肝癌、肝炎和/或肝硬化的試劑盒及在AKR1B10和AFP聯合定量測定中應用

在審

• 申請號: 202010062548.4
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號: CN111239410A
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發明（設計）人: 曹哲;陳志勇;祝躍球
• 申請（專利權）人: 湖南萊拓福生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/576;G01N33/574;G01N33/573
• 代理公司: 北京知本村知識產權代理事務所(普通合伙) 11039
• 代理人: 劉江良

1.一種用于檢測肝癌、肝炎和/或肝硬化的試劑盒，其特征在于，其包括銪標記的醛酮還原酶1B10檢測抗體和鋱標記的甲胎蛋白檢測抗體。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括增強液，其中包含β-NTA和TOPO，更優選地，所述增強液是25μmol/L β-NTA，50μmol/L TOPO，0.1% Triton X-100，0.5%無水醋酸，0.1%鄰苯二甲酸氫鉀， pH 3.0~4.0；還包括樣品稀釋液，其成分為：pH7.5±0.1的10mmol/L Tris?HCl，1% BSA，0.05%Tween 20，0.05% Proclin300。

3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括醛酮還原酶1B10抗原、甲胎蛋白抗原的標準品，優選地，所述抗原以一定濃度溶解于樣品緩沖液中配置而成，具體如醛酮還原酶1B10抗原濃度分別為0、375、750、1500、3000、6000pg/mL，甲胎蛋白抗原濃度分別為0、5、10、50、200、650ng/mL，緩沖液為10mmol/L Tris?HCl（pH7.5±0.1），1% BSA，0.05%Tween20，0.05% Proclin300。

4.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括清洗液，例如Tris-HCl、氯化鈉、Tween20和Proclin300或它們的混合溶液，在該試劑盒中以濃縮清洗液的形式存在，檢測時適當稀釋后使用；

優選的清洗液的配制方法是：50mM Tris?HCl（pH7.5±0.1），21%氯化鈉，2.5%Tween20，充分混勻后2~8℃保存，使用前稀釋25倍。

5.根據權利要求1中所述的試劑盒，其特征在于：所述銪標記的醛酮還原酶1B10檢測抗體為多克隆抗體或單克隆抗體， 優選為鼠抗單克隆抗；所述鋱標記的甲胎蛋白檢測抗體為多克隆抗體或單克隆抗體，優選為鼠抗單克隆抗體。

6.根據權利要求1中所述的試劑盒，其特征在于：所述兔抗醛酮還原酶1B10多克隆抗體和識別另一抗原位點的鼠抗甲胎蛋白單克隆抗體包被在微孔板中。

7.根據權利要求5中所述的試劑盒，其特征在于：所述醛酮還原酶1B10檢測抗體是將鼠抗醛酮還原酶1B10單克隆抗體與銪離子藕聯制備而成；所述甲胎蛋白檢測抗體是將鼠抗甲胎蛋白單克隆抗體與鋱離子藕聯制備而成。

8.根據權利要求1至7任一項所述的試劑盒，其特征在于，檢測的對象選自血清、尿液、乳汁、腸液、大便或組織樣本。

9.根據權利要求1至7任一項所述的試劑盒，其特征在于，檢測的用途選自肝癌、肝炎和肝硬化的篩查、診斷、療效判斷、預后評估或復發監測。

10.如權利要求1至8任一項所述的試劑盒在體外用于非診斷目的的定量檢測醛酮還原酶1B10和甲胎蛋白的含量。