[發明專利]特異性識別O3:K6型副溶血性弧菌的單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 202010061859.9
• 申請日: 2020-01-19
• 公開（公告）號: CN113121682B
• 公開（公告）日: 2022-08-26
• 發明（設計）人: 王慧;邱紅玲;儲瑞藹;王壽利
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海營養與健康研究所
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C12N5/20;G01N33/577;G01N33/569;C12R1/91
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種單克隆抗體，其是由保藏號為CCTCC NO: C202023的雜交瘤細胞株分泌的單克隆抗體。

2.一種雜交瘤細胞株，其在中國典型培養物保藏中心的保藏號是CCTCC NO: C202023。

3.權利要求1所述的單克隆抗體或權利要求2所述的雜交瘤細胞株的用途，用于制備特異性地識別或檢測O3:K6型副溶血性弧菌的檢測試劑或檢測試劑盒。

4.一種免疫綴合物，其特征在于，所述的免疫綴合物包括：

權利要求1所述的單克隆抗體；以及

與所述單克隆抗體連接的可檢測標記物。

5.如權利要求4所述的免疫綴合物，其特征在于，所述可檢測標記物包括：熒光標記物、顯色標記物。

6.如權利要求5所述的免疫綴合物，其特征在于，包括：辣根過氧化物酶、生物素、膠體金或熒光。

7.一種用于特異性識別或檢測O3:K6型副溶血性弧菌的試劑盒，其包括：

權利要求1所述的單克隆抗體，

權利要求2所述的雜交瘤細胞株；和/或

權利要求4所述的免疫綴合物。

8.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包括：捕獲抗體和檢測抗體；其中所述捕獲抗體為權利要求1所述的單克隆抗體，所述檢測抗體為權利要求4所述的免疫綴合物。

9.如權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述的捕獲抗體被固定在固相載體上。

10.如權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述固相載體包括：試紙、微球、包被板、玻片或芯片。

11.如權利要求10所述的試劑盒，其特征在于，所述的試紙為膠體金試紙。

12.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒中還包括：

與可檢測標記物相對應的底物；

顯色劑；

洗滌液；和/或

終止液。

13.一種離體非疾病診斷性地識別或檢測O3:K6型副溶血性弧菌的方法，利用權利要求1所述的單克隆抗體作為包被抗體捕獲待測樣品，利用權利要求4所述的免疫綴合物檢測，獲得O3:K6型副溶血性弧菌的存在情況以及存在量。

14.如權利要求13所述的方法，其特征在于，所述的待測樣品不是直接來自動物或人的樣品。

15.如權利要求13所述的方法，其特征在于，所述的待測樣品包括：水生動植物或其加工產物、臨床樣本。

16.如權利要求13所述的方法，其特征在于，所述的待測樣品為食品。

17.一種用于檢測O3:K6型副溶血性弧菌的測試件，其特征在于，其包括固相載體，以及附著于所述固相載體上的權利要求1所述的單克隆抗體。

18.如權利要求17所述的用于檢測O3:K6型副溶血性弧菌的測試件，其特征在于，所述的測試件為測試試紙。

19.如權利要求18所述的用于檢測O3:K6型副溶血性弧菌的測試件，其特征在于，所述測試試紙是免疫膠體金測試試紙。

20.一種制備包含權利要求1所述的單克隆抗體的免疫膠體金測試試紙的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1) 將權利要求1所述的單克隆抗體以0.5～2 mg/mL的包被濃度點到硝酸纖維素膜上，羊抗鼠二抗以0.5～2mg/ml作為Control點到硝酸纖維素膜上；干燥；

(2) 將權利要求1所述的單克隆抗體以膠體金標記，點到經干燥的硝酸纖維素膜上。