[發明專利]提高冬凌草甲素和迷迭香酸含量的冬凌草愈傷組織培養基有效

申請號：	202010060590.2	申請日：	2020-01-19
公開（公告）號：	CN111134020B	公開（公告）日：	2021-05-04
發明（設計）人：	崔麗濤;黃潔芳;陳強;李芡芡;徐曉明;王麗娜;畢永賢;蔣麗剛	申請（專利權）人：	珀萊雅化妝品股份有限公司
主分類號：	A01H4/00	分類號：	A01H4/00
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	310023 浙江省***	國省代碼：	浙江;33
權利要求書：	查看更多	說明書：	查看更多
摘要：
搜索關鍵詞：	提高冬凌草迷迭香酸含量組織培養基
鉆瓜網技術展會專利詞庫專利權人專利榜在售專利公布日期熱門專利

【說明書】：

本發明涉及提高冬凌草甲素和迷迭香酸含量的冬凌草愈傷組織誘導培養基，其特征在于由以下質量比的組分組成：3%~5%MS培養基，2%~2.5%1,5?脫水?D?葡糖醇，2~3%KNO₃與(NH₄)₂SO₄的混合物，0.1%~2%植物多胺，2%~5%苦參素，0.002%~0.004%月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽，0.3%~0.5%瓊脂，余量為去離子水。本發明具有同時提高冬凌草愈傷組織中冬凌草甲素和迷迭香酸含量的有益效果。

技術領域

本發明屬于植物細胞培養技術領域，特別涉及一種能夠提高冬凌草甲素和迷迭香酸含量的冬凌草愈傷組織培養基。

背景技術

冬凌草又名冰凌草、延命草，為唇形科香茶菜屬多年生草本植物，廣泛生長于在河南、山西、陜西等中部地區，適宜于亞熱帶及溫帶季風氣候的生長環境，植株的地上部分富含冬凌草甲素和迷迭香酸，兩者均有抗氧化、抗炎及抗菌功效。冬凌草甲素為貝殼杉烷型四環二萜類天然有機化合物，目前主要應用于臨床抗腫瘤治療藥物中，療效明顯；迷迭香酸為多酚類化合物，廣泛應用于化妝品領域，能通過清除體內自由基起到抗氧化功效，同時脂質過氧化能夠抑制，并具有廣譜抗菌作用，通過增加細菌膜的通透性從而殺滅細菌，對金黃色葡萄球菌等致病菌敏感性較高。

由于冬凌草活性成分在醫藥、保健品及化妝品等領域具有優良的使用功效，市場需求量很大，而冬凌草自身生長周期較長，從播種到采收需要將近一年的時間，加之人們對其挖掘采伐過度，造成了野生冬凌草資源匱乏，所以如何快速繁育品質優良且富含冬凌草甲素及迷迭香酸的冬凌草植株或組織變得尤為迫切。

目前，冬凌草快速繁殖技術多采用愈傷組織培養方法，但是培養過程還面臨著如下難題：現有研究多集中在通過優化培養工藝實現某一種成分的富集，同時高效富集冬凌草甲素和迷迭香酸的研究較為欠缺；其次，冬凌草屬于多年生草本植物，這類植物含有大量酚類物質，在進行愈傷組織誘導培養過程中，切口處易發生多酚氧化反應，進而出現褐化現象影響次生代謝產物的產量；此外，愈傷組織在培養過程中由于自身生物學特性或者環境因素等影響，易發生微生物污染影響增殖速度，較低的生物量亦不利于目標產物的累積。上述三大問題在現有冬凌草愈傷組織培養過程研究中未得到全面的解決。如《冬凌草細胞懸浮培養技術研究》中，通過對影響冬凌草細胞懸浮培養體系的各項關鍵因素進行研究，建立了冬凌草細胞懸浮培養體系，但并未探討培養工藝與代謝產物累積之間的相關性；《氮源和碳源對冬凌草愈傷組織生長及迷迭香酸的積累的影響》，通過改變培養基中氮源、碳源的添加比例來提高迷迭香酸的產量，但研究中并未對會嚴重影響愈傷組織成活率的褐化問題進行有效解決。

發明內容

本發明要解決的技術問題是，提供一種冬凌草愈傷組織誘導培養基，該培養基能同時提高冬凌草愈傷組織中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。

為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：提高冬凌草甲素和迷迭香酸含量的冬凌草愈傷組織培養基，其特征在于由以下質量比的組分組成： 3%~5% MS培養基，2%~2.5% 1,5-脫水-D-葡糖醇，2~3% KNO₃與 (NH₄)₂SO₄的混合物，0.1%~2% 植物多胺，2%~5%苦參素，0.002%~0.004% 月桂酰精氨酸乙酯鹽酸鹽，0.3%~0.5%瓊脂，余量為去離子水，所述KNO₃與(NH₄)₂SO₄的混合物中KNO₃與(NH₄)₂SO₄的摩爾比為1.8~3.2:1；所述植物多胺中含質量分數為1%的有效物，所述有效物為腐胺和亞精胺，所述有效物中腐胺與亞精胺的摩爾比為0.6~1.2:1。