[發明專利]檢測他汀類藥物代謝基因多態性的引物及探針組合物、試劑盒、方法

有效

• 申請號: 202010052082.X
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN111154861B
• 公開（公告）日: 2020-12-15
• 發明（設計）人: 劉福平;劉晶晶;鄭建權
• 申請（專利權）人: 深圳會眾生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11;C12Q1/686
• 代理公司: 深圳市博銳專利事務所 44275
• 代理人: 湯星星

本發明涉及檢測他汀類藥物代謝基因多態性的引物及探針組合物、試劑盒及檢測方法，該檢測他汀類藥物代謝基因多態性的引物及探針組合物，包括以下至少一對引物及探針組合物：用于檢測SLCO1B1位點的第一引物和第一探針；用于檢測APOE位點的第二引物和第二探針；用于檢測ABCB1位點的第三引物和第三探針；以及用于檢測LDLR位點的第四引物和第四探針。本發明的檢測他汀類藥物代謝基因多態性的試劑盒具有檢測全面、通量高、操作簡單、檢測迅速且安全無污染的優點。

技術領域

本發明涉及基因檢測技術，特別涉及一種檢測他汀類藥物代謝基因多態性 的引物及探針組合物、試劑盒及方法。

背景技術

他汀類藥物又稱為3-羥甲基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCo A)還原酶抑制 劑，近20多年來的眾多大規模臨床試驗結果顯示，他汀類藥物在ASCVD一級 和二級預防中均能顯著降低心血管事件風險，是防治此類疾病最為重要的藥物。 然而不同的他汀在化學結構上雖有相似之處，但它們在藥代動力學(吸收、結合 血漿蛋白、代謝和溶解度)與其他藥物相互作用、藥物療效以及他汀導致的不良 反應方面存在個體間的差異，而這些差異部分歸因于常見藥物基因的遺傳與變 異，SLCO1B1、APOE、ABCB1和LDLR基因則是近年來研究比較多的熱點基 因。

有機陰離子轉運多肽1B1(OATP1B1，又稱OATP-C、OATP2或LST1)特 異地表達在肝細胞基底膜上，在肝細胞攝取和清除內源性和外源性物質如膽汁 酸、非結合型膽紅素、甲狀腺素、他汀類藥物、瑞格列奈和伊立替康活性代謝 產物SN-38等中發揮重要作用。OATP1B1由SLCO1B1基因編碼，該基因具有 遺傳多態性，其中388AC和521TC是亞洲人群中的主要遺傳變異，等位基因 頻率為10～15％。突變型可顯著降低OATP1B1對其底物的攝取能力，使他汀類 藥物，如普伐他汀、阿托伐他汀和羅蘇伐他汀等的血藥濃度升高，增加橫紋肌 溶解癥或肌病的發生風險。為降低他汀類藥物嚴重不良反應的發生風險，建議 臨床上根據SLCO1B1基因型選擇他汀類藥物進行治療。

載脂蛋白E(Apolipoprotein E，APOE)是一種存在于乳糜微粒和中間密度 脂蛋白中的載脂蛋白，主要由肝臟和巨噬細胞產生，參與血脂的運輸、存儲和 排泄。人類APOE基因位于19號染色體19q13.2。該基因的兩個功能性SNP rs429358(c.388TC，Cys130Arg)和rs7412(c.526CT，Arg176Cys)構成3 種單倍型，分別是E2(rs429358T-rs7412T)、E3(rs429358T-rs7412C)、E4 (rs429358C-rs7412C)。由三種單倍型構成6種不同的基因型(E2/E2、E3/E3、 E4/E4、E2/E3、E2/E4和E3/E4)。E3/E3是最常見的基因型，人群中的頻率約60％。目前FDA已將APOE2列為普伐他汀藥物反應相關的生物標記。基因型 為APOE E2/E2的高血脂癥患者普伐他汀的降脂療效更好。

三磷酸腺苷結合盒轉運子A1(ABCA1)基因所編碼的ABCA1蛋白在膽固醇 的逆向轉運和機體高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的形成中起到關鍵作用。當 ABCA1基因發生突變時，可影響其蛋白質的轉錄和翻譯，從而影響機體血脂水 平。在已發現的ABCB1的將近50個SNP中，2677TG和3435CT均能夠影 響P-gp的轉運底物，導致阿托伐汀療效的個體化出現差異。相關學者研究發現 ABCA1基因多態性與機體血脂異常等疾病存在相關性。