[發明專利]一種檢測DNA片段含量的多通道檢測方法

有效

• 申請號: 202010049392.6
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111157719B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 王蓓;申志遠;何世潭;何永紅
• 申請（專利權）人: 清華珠三角研究院;廣州廣華深啟科技有限責任公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/531
• 代理公司: 深圳新創友知識產權代理有限公司 44223
• 代理人: 江耀鋒

本發明公開了一種檢測DNA片段含量的多通道檢測方法，根據金納米棒、磁珠和待測樣品可形成穩定結構的特性，通過計算金納米棒的比例關系確定待測楊樣品中DNA的比例關系。本發明第一次將高光譜解碼技術應用于金納米棒的消光光譜的分解中，提出了基于高光譜解碼技術解碼金納米棒消光光譜實現生物分子檢測的方法，提高了金納米棒作為編碼材料應用于實際檢測中的利用效率，實現了生物分子的多通道分析，有利于稀少樣本的檢測。

技術領域

本發明涉及免疫學檢測方法，尤其涉及一種新的生物分子含量檢測試劑及方法。

背景技術

隨著生命科學的發展，生物分子的檢測和分析已成為生物醫學領域不可或缺的一部分。通過定量和定性檢測，可以實現生物分子的鑒定，從而完成疾病的預防和診斷。在實際應用中，通常需要同時檢測和分析多種生物分子，這意味著多通道分析技術在實際檢測中很重要。而近年來，許多研究人員不斷努力為生物分子的檢測和分析創造新的方法和技術，而新的檢測和分析技術中金納米粒子的應用就是其中重要的例子之一。

金納米棒(AuNRs)是一種從幾納米到幾百納米的棒狀金納米粒子，具有相對穩定但非常豐富的化學和物理性質，局部表面等離子體共振(LSPR)作為其獨特的光學特性，在特定波長的光下產生共振后可以使金屬納米顆粒在紫外-可見(UV-vis)光帶中表現出強烈的光譜吸收。一般，金納米棒在紫外-可見消光光譜中有兩個峰：橫向LSPR峰和縱向LSPR峰，隨著金納米棒長徑比的不斷變化，橫向LSPR峰值位置基本保持不變，但縱向LSPR峰值位置則發生相應的變化。理論上，不同長徑比的金納米棒具有不同的縱向LSPR峰，若利用這一特點，可以將金納米棒用作編碼材料來檢測生物分子。但是考慮到金納米棒的半高寬比較寬，當不同長徑比的金納米棒作為編碼材料混合時會發生光譜重疊，這限制了編碼消光光譜在實際檢測中的利用效率。

高光譜技術，起源于遙感領域，可以提供連續的光譜特征，已經應用于許多領域，其中高光譜解混是高光譜技術研究的重要一步，而在高光譜解碼算法中，會假設不同的端元之間不會相互干擾，這與不同長徑比的金納米棒的消光光譜混合時互不影響特點一致。混合光譜是由不同的基本光譜線性組合得到，利用高光譜解混算法，可以實現分解混合光譜的目的。若考慮將高光譜解碼算法與金納米棒的LSPR特性組合，有望實現生物分子的多通道檢測。

現有技術中，由于金納米棒消光光譜的光譜較寬，利用金納米棒的消光光譜作為編碼元素實現生物分子檢測的方法很少。高光譜解碼算法并未應用于金納米棒消光光譜的解碼，高光譜解碼算法結合目標生物分子、金納米棒和磁珠形成的“三明治”結構用于生物分子檢測也未得到過相應的報道與應用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測DNA片段含量的多通道檢測方法。

本發明所采取的技術方案是：

本發明的第一個方面，提供：

一種用于檢測DNA片段含量多通道檢測方法的檢測試劑，包括：偶聯有單鏈核苷酸序列A的磁珠，其中，核苷酸序列A可與目標單鏈DNA一端的序列互補配對；偶聯有單鏈核苷酸序列B的金納米棒，其中，核苷酸序列B可與目標單鏈DNA另一端的序列互補配對。

偶聯有單鏈核苷酸序列A的磁珠和偶聯有單鏈核苷酸序列B的金納米棒可以與目標單鏈結合成穩定結構。

當然，也可以根據實際的需要，選擇其他具有特異性吸附能力的材料替代磁珠，以達到固定待測樣品的作用。

在一些實例中，上述金納米棒包括至少兩種不同長徑比的金納米棒。

在一些實例中，上述不同長徑比的金納米棒上偶聯有針對不同目標單鏈DNA的單鏈核苷酸序列。其目的在于區分不同目標單鏈DNA。

本發明的第二個方面，提供：

一種檢測DNA片段含量的多通道檢測方法，具體步驟為：