[發(fā)明專利]一種冠心病核酸分子標志物及其引物和應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010032220.8
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111057760A
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭芳;梁賓;干學東;李夢蘭;向陽
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢大學
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 武漢科皓知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 艾小倩

本發(fā)明提供一種冠心病核酸分子標志物及其引物和應用，所述標志物為環(huán)狀RNA hsa_circ_0000615，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述標志物能夠用于輔助診斷冠心病。本發(fā)明提供的冠心病核酸分子標志物對冠心病具有較高的診斷價值，利用冠心病核酸分子標志物的引物能夠制備冠心病輔助診斷試劑盒，用于檢測冠心病核酸分子標志物的表達水平，輔助診斷冠心病，使得冠心病的診斷更加方便易行。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學專業(yè)領(lǐng)域，具體涉及一種冠心病核酸分子標志物及其引物和應用。

背景技術(shù)

冠心病(coronary artery disease，CAD)又稱為冠狀動脈粥樣硬化性心臟病，是一組由于冠狀動脈發(fā)生粥樣硬化病變，使血管腔狹窄或阻塞，引起斑塊形成甚至破裂、完全堵塞血管，導致心肌缺血、缺氧甚至壞死的疾病，在臨床上引起心絞痛、心肌梗死等一系列嚴重的癥狀。冠心病的發(fā)病率正在逐年上升，因其致殘率高、死亡率高、復發(fā)率高、并發(fā)癥多，成為嚴重威脅人類身體健康和生存質(zhì)量的頭號殺手。

冠心病的發(fā)生發(fā)展涉及慢性炎癥、氧化應激、脂質(zhì)代謝等多種病理過程，是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果。冠心病的診斷方法主要有心電圖、冠脈CT、冠狀動脈造影等。然而心電圖的敏感性和特異性較低；冠脈CT需要專門的儀器和診斷人員；冠狀動脈造影具有較高的確診率，但許多低收入家庭以及癥狀輕微、思想保守的患者不愿意接受這種侵入性檢查。因此，迫切需要一種低成本、便捷的方法來輔助冠心病的早期診斷。核酸類生物標志物發(fā)展迅猛，特別是非編碼RNA，由于其相對穩(wěn)定性與檢測便捷性受到普遍青睞，已經(jīng)有獲得CFDA批準的肝癌輔助診斷的微小RNA試劑盒面市。

環(huán)狀RNA(circularRNA，circRNA)是一類在真核細胞中大量表達的非編碼RNA，由一個或多個外顯子、內(nèi)含子或兩者共同反向剪接形成。因其不具有5’端帽子結(jié)構(gòu)和3’端poly(A)尾巴結(jié)構(gòu)，能夠耐受核酸酶的消化，穩(wěn)定性顯著高于線性RNA。越來越的研究證實環(huán)狀RNA在基因表達及調(diào)控中發(fā)揮著非常重要作用。目前，circRNA因其豐富、保守及結(jié)構(gòu)穩(wěn)定等特征，作為核酸類分子標志物在疾病診斷中發(fā)揮極大潛能。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的之一在于提供一種冠心病核酸分子標志物，所述標志物為環(huán)狀RNAhsa_circ_0000615，其表達量與冠心病發(fā)生相關(guān)，具有重要的臨床意義。

本發(fā)明目的之二在于提供一種冠心病核酸分子標志物在冠心病輔助診斷中應用，通過檢測外周血白細胞hsa_circ_0000615的表達量，輔助診斷冠心病，對冠心病具有一定的診斷價值。

本發(fā)明目的之三在于提供一種冠心病核酸分子標志物的引物，利用所述引物能夠測定外周血白細胞中的hsa_circ_0000615含量，使得冠心病的輔助診斷更加方便易行。

本發(fā)明目的之四在于提供一種冠心病核酸分子標志物的引物的應用，利用所述引物制備冠心病輔助診斷試劑盒，用于快速簡便檢測外周血白細胞中的hsa_circ_0000615含量。

本發(fā)明實現(xiàn)目的之一采用以下技術(shù)方案：

一種冠心病核酸分子標志物，所述標志物為環(huán)狀RNA hsa_circ_0000615，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

進一步地，所述標志物來自外周血白細胞。

本發(fā)明實現(xiàn)目的之二采用以下技術(shù)方案：

一種冠心病核酸分子標志物在冠心病輔助診斷中應用。

進一步地，所述hsa_circ_0000615表達水平升高，提示患者患有冠心病。

本發(fā)明實現(xiàn)目的之三采用以下技術(shù)方案：

一種冠心病核酸分子標志物的引物，所述引物的序列如SEQ NO:2和SEQ NO:3所示。