[發明專利]腫瘤特異性抗原CTL表位肽及其應用

有效

• 申請號: 202010032069.8
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111116728B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 吳亞紅;李玉冰;王志偉;董鈺;高艷鋒;祁元明;冉令;時冉冉
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;A61K39/00;A61P35/00;A23L33/18
• 代理公司: 鄭州亦鼎知識產權代理事務所(普通合伙) 41188
• 代理人: 張夏謙

本發明公開了一種多肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明還提供了含所述多肽的藥物組合物、食品或保健品及多肽的對應用途。本發明篩選獲得表位肽，通過體內外胞內因子染色和細胞殺傷實驗等對表位肽進行鑒定，為后續研制基于腫瘤突變抗原的疫苗以及診斷制劑提供了理論基礎，并為設計基于該表位的TCR?T(T細胞受體?T淋巴細胞)及混合T細胞表位的腫瘤多表位疫苗提供更多的選擇。

技術領域

本發明具體涉及腫瘤特異性抗原CTL表位肽及其應用。

背景技術

腫瘤免疫治療憑借卓越的臨床療效和創新性位居Science雜志2013評選的十大科學突破之首。2018年度諾貝爾生理學或醫學獎授予在免疫檢查點阻斷療法領域具有突出貢獻的James Allison教授與Tasuku Honjo教授。自2011年至今，FDA已批準多款靶向免疫檢查點CTLA-4(Ipilimumab)、PD-1(Nivolumab、Pembrolizumab、Cemiplimab)等單抗藥物用于治療腫瘤患者。高通量測序技術不斷發展，大量研究顯示免疫檢查點阻斷療法的效果與腫瘤突變負荷正相關。腫瘤突變負荷(tumor mutation burden，TMB)為基于全基因組測序、全外顯子或target pannel測序，腫瘤基因組去除胚系突變(germline mutation)后的體細胞突變數量(somatic mutation)。腫瘤突變負荷越高其可能產生的突變抗原數量越多，而免疫療法依賴于患者體內免疫細胞對腫瘤特異性抗原表位的識別，所以腫瘤突變負荷越高患者越可能從免疫療法中獲益。2016年，在《Science》雜志中發表的研究表明腫瘤中突變抗原(mutant antigen)豐富的晚期黑色素瘤、非小細胞肺癌患者對CTLA-4、PD-1單抗藥物的敏感性增強。在后續的大量研究中發現，無論癌癥的組織起源是什么，大量的突變抗原會使其對免疫檢查點阻斷療法更敏感。所以在腫瘤免疫治療策略中，突變抗原的表達和識別已成為決定癌癥免疫療法臨床療效的主要因素之一。

突變抗原為腫瘤特異性抗原(tumor specific antigen，TSA)，區別于腫瘤相關抗原(tumor associated antigen，TAA)。腫瘤突變抗原是指那些可以被免疫細胞識別并能夠激活免疫系統、由癌細胞基因突變所產生的異常蛋白質。因突變抗原為腫瘤組織特異，相較于腫瘤相關抗原具有多靶點、廣譜、安全的特點。基于腫瘤突變抗原表位的研究已經取得諸多研究成果。

食管鱗癌高發于中國，河南北部林縣、安陽、輝縣所處的太行山地帶為中國食管鱗癌發病率及死亡率最高的地區。目前仍然未有針對食管鱗癌的免疫治療藥物獲批上市。高通量測序技術證明食管鱗癌中存在大量基因突變，具有較高的TMB值，有很大的可能產生突變抗原。在我國人群中HLA-A2亞型頻率超過50％，因此鑒定該亞型限制性表位更具有實際治療意義。隨著腫瘤免疫治療及二代測序技術的發展，對大量的食管鱗癌患者進行全外顯子測序的結果顯示食管鱗癌中存在大量突變抗原，提示這些突變抗原可能成為食管鱗癌免疫治療的新靶點。

發明內容

第一方面，本發明提供一種腫瘤特異性突變抗原PCLO-E4090Q來源的抗腫瘤CTL表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

所述表位肽可通過固相合成制得，如采用標準Fmoc方案制備。

第二方面，本發明提供了含所述表位肽的食品、保健品或藥物組合物，藥物組合物可包括多肽、融合蛋白、DNA、TCR-T構建及其藥學上可接受的載體或賦形劑等形式，其藥用形式可為疫苗。

第三方面，本發明提供了所述表位肽在制備所述食品、保健品或藥物組合物中的用途。

第四方面，本發明提供編碼所述表位肽的DNA分子，或由含有編碼所述表位肽的DNA分子編碼的重組蛋白。