[發明專利]一條腫瘤相關抗原CTL表位肽及其應用

在審

• 申請號: 202010031057.3
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN113105528A
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發明（設計）人: 魏敏杰
• 申請（專利權）人: 遼寧中健醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一條來源于腫瘤相關抗原抗腫瘤優勢CTL表位肽，為HLA?A2限制性抗腫瘤CTL表位肽，能夠直接與MHC分子結合，而不需要APC的加工處理，它與天然的內源性肽在激活免疫系統方面具有相同的效果，為十四肽，其序列為：AALVLTYLAVASA；所述的抗腫瘤優勢CTL表位肽，為具有該氨基酸序列的游離型多肽、融合型多肽和嵌合型多肽；以及以上所述為單體的各種形式的聚合體。本發明提供能與人HLA?A2分子的結合位點進行結合、可激活腫瘤特異性的CTL細胞的表位肽。本發明提供的HLA?A2限制性CTL表位肽可用于研制靶向腫瘤的的治療性肽疫苗，為上皮樣惡性腫瘤精準免疫治療提供理論基礎。

技術領域

本發明涉及腫瘤的免疫治療領域，尤其涉及HLA-A2限制性ECM1特異性的CTL表位肽及其應用，特別涉及通過腫瘤疫苗特異性誘導、刺激活化生物體腫瘤特異性T淋巴細胞，激發、增強生物體抗腫瘤免疫功能及其在特異性抗腫瘤免疫治療中的應用方案。

背景技術

近年來，隨著對免疫應答分子機制研究的深入，現已逐漸認識到機體的免疫細胞并不是對應于各種各樣的病原體或天然抗原的整體分子，而是針對各種各樣抗原分子的抗原表位，即蛋白質抗原是通過其表位來體現其免疫特異性。目前的研究表明，CD8+T細胞所識別的靶抗原需先經抗原提呈細胞處理，之后以“抗原肽-MHC-I類分子”復合物的形式呈現在抗原提呈細胞或靶細胞表面，相應的與MHC-I類分子結合的抗原肽即為CTL表位。表位肽能夠激活誘導產生特異性細胞毒性T淋巴細胞（CTL細胞），可對人類白細胞抗原（HLA）配型匹配的腫瘤有一定的殺傷效果。中國人群中MHC-I類最常見的亞型型為HLA-A2。因此，篩選HLA-A2限定性且可識別ECM1的CTL表位，可實現針對HLA配型匹配的惡性上皮腫瘤的靶向免疫治療。

發明內容

合成肽疫苗是近年來出現的新型疫苗研究方向，合成肽能夠直接與MHC分子結合，而不需要APC的加工處理，它與天然的內源性肽在激活免疫系統方面具有相同的效果，因此合成肽疫苗廣泛應用于抗病毒免疫治療。目前已有多種基于多肽表位的合成肽疫苗進入臨床研究階段或已上市。建立在CTL表位鑒定基礎之上的CTL表位肽疫苗，由于人工合成多肽不包含病原生物的無關成分，只誘導特異性CTL應答，因此安全、穩定、毒副作用少，且研制周期大大縮短。更重要的是，基于CTL表位研發的多個CTL表位組合，還可設計針對一種或多種病原體的多價CTL表位肽疫苗。因此CTL表位合成肽疫苗已成為治療腫瘤研究的一個新策略，而對HLA-A2限制性ECM1特異的CTL 表位肽即成為研究的關鍵；

由于 CTL 表位與主要組織相容性復合體 (MHC)- I 類分子的結合是誘導 CTL 免疫應答的關鍵因素，而CTL表位與 MHC- I類分子結合的重要基礎是錨定殘基，因此，可通過改變錨定殘基或其相鄰位置的氨基酸殘基以達到增強免疫原性而不影響特異性的目的。本發明提供一種腫瘤相關抗原來源的MHC-I 限制性CTL 表位，能夠誘導肽特異性的 CTL 免疫應答，表現為刺激肽特異性CTL 分泌高水平的 IFN-γ并對腫瘤細胞產生特異性殺傷效應；

該腫瘤相關抗原優勢表位肽為十三肽，其氨基酸序列為：AALVLTYLAVASA

所述的能夠與MHC-I類分子結合特異性激活CTL的靶向抗腫瘤CTL優勢表位肽可通過人工合成，或通過原核細胞或真核細胞表達出純化獲得；

所述的抗腫瘤CTL優勢表位肽根據表位肽與人HLA-A2分子相互作用機理，并根據其能有效與HLA-A2分子結合并能激活特異性T淋巴細胞的特性鑒定為有效的表位肽，該表位肽長度為13個氨基酸序列，體外容易合成，方便臨床應用；