[發(fā)明專利]一種萊克多巴胺、沙丁胺醇的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010030570.0
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN111024952A
• 公開（公告）日: 2020-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張波;張學(xué)記;郗日沫;王鵬;劉向陽;雷達(dá)
• 申請（專利權(quán)）人: 沭陽康源泰博生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/543;G01N33/53
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供一種萊克多巴胺、沙丁胺醇的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒，該試劑盒包括偶聯(lián)有抗萊克多巴胺抗體、抗沙丁胺醇抗體的免疫磁珠固相載體和裝載該免疫磁珠固相載體的配套試試劑盒。所述復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒是將偶聯(lián)有萊克多巴胺抗體、沙丁胺醇抗體的免疫磁珠固相載體放入特定的試劑盒，該試劑盒配合免疫磁珠純化儀，可全自動化完成動物組織、水產(chǎn)品、肉制品等產(chǎn)品中萊克多巴胺、沙丁胺醇的富集與分離，分離能力強(qiáng)，后與高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法等聯(lián)合使用，可高效、準(zhǔn)確檢測樣品中萊克多巴胺、沙丁胺醇的含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于樣本前處理領(lǐng)域，具體涉及一種萊克多巴胺、沙丁胺醇的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒。

背景技術(shù)

萊克多巴胺、沙丁胺醇是一種人工合成的β腎上腺受體激動劑，可用于治療充血性心力衰竭癥、肌肉萎縮癥，擴(kuò)張支氣管和增加肺通量。此外，此類藥物還可以作為牛、羊、豬、禽等的促生劑，曾一度被廣泛用于禽獸生產(chǎn)。近年來，萊克多巴胺、沙丁胺醇作為飼料添加劑，在畜牧業(yè)非法使用的情況越來越嚴(yán)重，尤其是在豬的肝臟等內(nèi)臟器官殘留較高，食用后直接危害人體健康。所以我國明確規(guī)定禁止萊克多巴胺、沙丁胺醇及其制品在食品動物的飼養(yǎng)過程中使用，因而加強(qiáng)對動物食品中興奮劑殘留的檢測是必要的。

目前檢測萊克多巴胺、沙丁胺醇的方法是免疫學(xué)法和色譜分析法。這兩種方法雖然靈敏度高，但樣本前處理及測定操作繁瑣，費用高，不適宜于大量樣本的篩查，鑒于此，為了實現(xiàn)快速地對樣本中的萊克多巴胺、沙丁胺醇的含量進(jìn)行定量分析，建立一種高效、快速、簡單、富集純化效果高的萊克多巴胺、沙丁胺醇的樣本前處理方法具有非常重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是在于針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種萊克多巴胺、沙丁胺醇的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒，用于樣本中鹽萊克多巴胺、沙丁胺醇富集與凈化，以解決萊克多巴胺、沙丁胺醇樣本樣品凈化分離操作復(fù)雜、分離效率低的等技術(shù)問題。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種萊克多巴胺、沙丁胺醇的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒，包括偶聯(lián)有萊克多巴胺抗體、沙丁胺醇抗體的免疫磁珠固相載體和裝載該免疫磁珠固相載體的配套試試劑盒，所述的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒是將偶聯(lián)有萊克多巴胺抗體、沙丁胺醇抗體的免疫磁珠固相載體放入特定的試劑盒，其以免疫磁珠為固相載體，經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)活化，使得磁珠表面帶有親和配基，活化后磁珠與萊克多巴胺抗體、沙丁胺醇抗體偶聯(lián)，制得能夠?qū)θR克多巴胺、沙丁胺醇實現(xiàn)快速富集和純化的樣本前處理試劑盒，以便后續(xù)HPLC或酶聯(lián)免疫吸附法的測量。

優(yōu)選地，免疫磁珠的濃度為5-100mg/mL。

優(yōu)選地，每個免疫磁珠凈化試劑盒中所含抗萊克多巴胺單克隆抗體、抗沙丁胺醇單克隆抗體分別為0.5-5mg/mL、0.8-8mg/mL。

優(yōu)選地，免疫磁珠保存液為pH7.4，0.02mo1/L的PBS緩沖液。

優(yōu)選地，所述試劑盒的具體使用步驟具體為：將偶聯(lián)有萊克多巴胺抗體、沙丁胺醇抗體的免疫磁珠從冰箱中取出恢復(fù)至室溫，旋轉(zhuǎn)混勻，將預(yù)先處理的樣本溶液放入試管中，后將免疫磁珠轉(zhuǎn)移至試管中，充分旋轉(zhuǎn)重懸，室溫下旋轉(zhuǎn)捕獲20min，以實現(xiàn)最大程度地捕獲樣本中的萊克多巴胺和沙丁胺醇，利用磁架進(jìn)行磁分離，緩慢棄去上清液；將已捕獲過樣本的免疫磁珠利用清洗液清洗數(shù)次，輕搖重懸磁分離；已實現(xiàn)萊克多巴胺和沙丁胺醇的樣本富集凈化液；將上述得到的樣本富集凈化液利用有機(jī)溶劑為洗脫液進(jìn)行洗脫，室溫震蕩幾秒鐘，磁分離，上清液即為待測的萊克多巴胺、沙丁胺醇的樣本，可用于后續(xù)的HPLC或酶聯(lián)免疫吸附法測定。

一種萊克多巴胺、沙丁胺醇的復(fù)合免疫磁珠凈化試劑盒，具體制備方法為：

（1）抗體預(yù)處理：將已純化好的抗萊克多巴胺單克隆抗體、抗沙丁胺醇單克隆抗體置于pH6.5 50mmol/L緩沖液透析過夜12h；