[發明專利]一種雞法氏囊病精制卵黃抗體泡騰片的制備方法

在審

• 申請號: 202010000132.X
• 申請日: 2020-01-01
• 公開（公告）號: CN111000998A
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發明（設計）人: 安同偉;陳慶忠;李迎梅
• 申請（專利權）人: 天津赫萊恩特生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/42
• 分類號: A61K39/42;A61K9/20;A61P31/14;C07K16/10;C07K16/02;C07K1/34;C12N1/20;C12R1/01;C12R1/125
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本發明提供了一種用于雞法氏囊病精制卵黃抗體泡騰片的制備方法，該制備方法利用雞傳染性法氏囊油乳劑滅活苗免疫健康高產蛋雞，收集高免蛋，提取卵黃抗體；附以益生菌，添加凍干保護劑和泡騰材料制備而得。該方法創新性的設計了雞法氏囊病卵黃抗體的新劑型，豐富了雞法氏囊病防控新途徑，本發明方法成本低，抗體效價高，使用方便，生物安全性高，有效保證了所得卵黃抗體的治療效果。

技術領域

本發明屬于獸用生物制品技術領域，具體涉及一種雞法氏囊病精制卵黃抗體泡騰片的制備方法。

背景技術

家禽集約化養殖帶來前所未有的高速發展的同時也造成了雞傳染性法氏囊病等高度接觸性傳染病的迅猛發生，造成該病病毒主要在法氏囊的淋巴細胞內增殖，并且對其它免疫器官造成不同程度的損傷，最終導致雞的法氏囊萎縮而引起雞的免疫抑制。該病無明顯的季節性，一年四季均可發生，發病率可達90％以上，臨床上可以導致體重減輕、生長緩慢和骨骼肌出血等癥狀，一旦發生疫病，則傳染快，死亡率高，死亡率達80％以上，損失更大，給養雞業帶來了巨大的經濟損失。

卵黃抗體充分利用了母源性免疫，具有性質穩定、特異性強、制備成本低、口服安全等優點在家禽、家畜傳染病的防治中已得到廣泛的應用黃芪多糖為增強免疫力的一種中藥多糖，可以參與動物機體細胞的各種活動，具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂質過氧化的能力；蒲公英黃酮抗氧化和抑菌功效顯著，益生菌則進一步加強了本發明的抑菌、調節腸道環境促消化作用，制成泡騰劑一方面可以改善拌料飼喂不均，還可以解決傳統抗體冷鏈運輸的麻煩。

發明內容

本發明的目的在于提供一種雞法氏囊病精制卵黃抗體泡騰片的制備方法，該方法設計新穎，解決了現有技術中冷鏈運輸抗的不便，易于運輸和保存，無生物毒性，有利于環境衛生及食品安全。

本發明的另一個目的在于解決了現有技術中卵黃抗體注射應激大，效果差的弊端。

為達到上述目的，本發明是通過以下技術方案實現的：

1.一種雞法氏囊病精制卵黃抗體泡騰片的制備方法，其特征在于：該制備方法的步驟如下：

(1)取未經免疫的23周齡健康產蛋雞，對其進行雞傳染性法氏囊油乳劑滅活苗3次免疫注射，免疫間隔為10天，用量1ml/只/次，檢測血清抗體效價至1:256時收集高免蛋；

(2)清洗消毒步驟(1)中所得高免蛋，收集并攪拌得卵黃勻漿；

(3)對步驟(2)中所得卵黃勻漿中添加1.5倍體積的生理鹽水和濃度為0.1％的正辛酸，邊加邊攪拌0.5～1.5小時，室溫放置2～6小時后，以4200～5500r/min的轉速離心30min，丟棄沉淀，在上清液中加入1.2％硫酸酯葡聚糖，攪拌10-20分鐘，用孔徑5μm和1μm的筒式濾芯過濾上清液，再經截留分子量為10kD的中空纖維超濾柱進行濃縮3～4倍后再用NaOH調整PH值為6.8～7.0，并以0.45μm和0.22μm筒式濾芯過濾除菌，得抗體效價1:128的濾液。

(4)制備益生菌液：取雙歧桿菌和枯草芽孢桿菌分別進行培養，再將兩種菌液混合，得到益生菌液；

(5)將步驟(3)所述濾液與步驟(4)得到的益生菌液在無菌條件下按體積比1:1混合均勻，再按體積比1:1添加凍干保護劑混合均勻，冷凍真空干燥處理，得到凍干粉，

(6)將步驟(5)得到的凍干粉與泡騰材料混合均勻，壓片，分裝，得到雞傳染性法氏囊病卵黃抗體復合泡騰片。

作為優選，步驟(2)中所述的消毒高免蛋和收集卵黃的方法為：取步驟1)所得高免蛋，用清水沖洗干凈后浸入0.1％新潔爾滅水溶液中消毒15分鐘，取出晾干，再用環氧乙烷氣霧消毒30分鐘后，送入蛋清蛋黃分離機分離得到卵黃，攪拌得到卵黃勻漿。