[發明專利]在免疫球蛋白重鏈編碼序列中具有DH-DH重排能力的非人動物

在審

• 申請號: 201980039940.2
• 申請日: 2019-06-14
• 公開（公告）號: CN112312766A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: A·J·莫菲;L·麥克唐納;C·郭;J·麥克沃特;V·沃羅尼納
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;C12N15/85;C12N5/10;C12N5/12;C07K14/705
• 代理公司: 北京市君合律師事務所 11517
• 代理人: 張怡;顧云峰

1.一種包含工程化重鏈多樣性(D_H)基因區段的核苷酸分子，所述工程化重鏈多樣性基因區段包含有效地連接至23聚體重組信號序列(RSS)的至少一個D_H基因區段。

2.根據權利要求1所述的核苷酸分子，其中所述核苷酸序列包含工程化D_H區，所述工程化D_H區包含(i)有效地連接至23聚體RSS的至少一個D_H基因區段和(ii)在一側側接有12聚體RSS且在另一側側接有另一個12聚體RSS的未重排的D_H基因區段，并且

其中(i)所述至少一個有效地連接至23聚體RSS的D_H基因區段和(ii)所述在一側側接有12聚體RSS且在另一側側接有另一個12聚體RSS的未重排的D_H基因區段被有效地連接，使得(i)和(ii)能夠根據12/23規則在D_H-D_H重組事件中進行連接，

任選地其中所述工程化D_H區僅包含人D_H基因區段。

3.根據權利要求2所述的核苷酸分子，其中所述核苷酸分子還包含：

(a)至少一個未重排的免疫球蛋白重鏈可變(V_H)基因區段，其位于所述工程化D_H區的上游并與之有效地連接，

(b)至少一個未重排的免疫球蛋白重鏈連接(J_H)基因區段，其位于所述工程化D_H區的下游并與之有效地連接，或

(c)(a)和(b)的組合。

4.根據權利要求3所述的核苷酸分子，其中所述至少一個V_H基因區段包含未重排的人V_H6-1基因區段，所述至少一個J_H基因區段包含未重排的人J_H6基因區段，或其組合。

5.根據權利要求3或4所述的核苷酸分子，其中所述至少一個未重排的J_H基因區段包含未重排的人J_H4基因區段、未重排的人J_H5基因區段和未重排的人J_H6基因區段。

6.根據權利要求3-5中任一項所述的核苷酸分子，其中所述至少一個未重排的J_H基因區段包含未重排的人J_H1基因區段、未重排的人J_H2基因區段、未重排的人J_H3基因區段、未重排的人J_H4基因區段、未重排的人J_H5基因區段和未重排的人J_H6基因區段，任選地其中所述未重排的人J_H1、J_H2、J_H3、J_H4、J_H5和J_H6基因區段處于種系構型中。

7.根據權利要求3-6中任一項所述的核苷酸分子，其中至少一個未重排的V_H基因區段包含任選地處于種系構型中的、跨越并包括未重排的人V_H3-74和未重排的人V_H1-6基因區段的功能性未重排的人V_H基因區段的全部庫。

8.根據前述權利要求中任一項所述的核苷酸分子，其還包含一個或多個功能性嚙齒動物Adam6基因，任選地其中所述一個或多個功能性嚙齒動物Adam6基因位于人V_H1-2基因區段與人V_H6-1基因區段之間和/或替換人Adam6基因。

9.根據前述權利要求中任一項所述的核苷酸分子，其中所述23聚體RSS與所述至少一個D_H基因區段的5'端鄰接。