[發明專利]進行性骨化性纖維發育不良的嚙齒類動物模型

在審

• 申請號: 201980039059.2
• 申請日: 2019-06-12
• 公開（公告）號: CN112292030A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: S·J·哈特賽爾;A·N·艾科諾米德斯;C·舍恩赫爾;V·J·艾旦
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 北京市君合律師事務所 11517
• 代理人: 孫倩;張怡

本發明提供了包含經修飾的Acvr1基因的經遺傳修飾的嚙齒類動物，所述基因包含側翼為位點特異性重組酶識別位點、處于反義方向的編碼R258G的條件改變的外顯子7，其中所述改變的外顯子在重組酶作用下被倒位為有義方向，導致異位骨形成。

相關申請的變叉引用

本申請要求于2018年6月13日提交的美國臨時申請號62/684,582、以及于2019年4月3日提交的美國臨時申請號62/828,532的優先權權益，所述美國臨時申請的全部內容以引用的方式并入本文。

技術領域

本公開內容涉及經遺傳修飾的嚙齒類動物和人疾病的嚙齒類動物模型。更具體而言，本公開內容涉及其基因組包含經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因的經遺傳修飾的嚙齒類動物；顯示出進行性骨化性纖維發育不良(FOP)的表型特點，例如異位骨形成的嚙齒類動物；其基因組包含經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因的經分離的嚙齒類動物組織和細胞；包含經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因的經分離的核酸；制備經遺傳修飾的嚙齒類動物的組合物和方法；育種方法；以及使用經遺傳修飾的嚙齒類動物的方法。

以引用的方式并入的序列表

4KB的命名為36190_10461US01__SequenceListing.txt，于2019年6月6日創建，并且經由EFS-Web提交給美國專利及商標局(United States Patent and TrademarkOffice)的ASCII文本文件中序列表，以引用的方式并入本文。

背景技術

在說明書自始至終引用了各種出版物，包括專利、專利申請、公開的專利申請、登錄號、技術文章和學術文章。這些引用的出版物各自整體且為了所有目的以引用的方式并入本文件中。

Acrvl是骨形態發生蛋白(BMP)的I型受體。人ACVRl基因中的某些突變，包括引起氨基酸修飾R206H或R258G的突變，與疾病進行性骨化性纖維發育不良(FOP)強相關(參見例如，美國專利申請公開號2009/0253132；Pignolo，R.J.(2011)Orphanet Journal of RareDiseases，6：80，1-6；以及Kaplan等人，Am J Med Genet A.2015；167(10)：2265-2271)。在Acvrl中攜帶R206H突變的嵌合小鼠發展FOP樣表型(參見例如，Chakkalakal等人(2012)J.Bone and Mineral Res.27：1746-1756)。Acvrl基因中的某些突變，例如導致R206HAcvrl蛋白變體的突變，在小鼠中是圍產期致死的，并且對通過嚙齒類動物的種系傳遞包含該突變的敲入基因提出了挑戰。

發明內容

本公開內容涉及經遺傳修飾的嚙齒類動物，其在其種系中包括包含經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因的核酸序列。

本發明提供了經遺傳修飾的嚙齒類動物，其在其種系中包括包含經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因的核酸序列，其中經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因包含嚙齒類動物Acvrl基因的條件性改變，其中所述改變致使嚙齒類動物易受異位骨形成影響。

本發明提供了經遺傳修飾的嚙齒類動物，其在其種系中包括包含經修飾的嚙齒類動物Acvrl基因的核酸序列，所述基因包含條件改變的Acvrl外顯子，其中所述條件改變的Acvrl外顯子的表達誘導對嚙齒類動物賦予對異位骨形成的易感性。在一個實施例中，改變的Acvrl外顯子是外顯子7。在一個具體實施例中，改變的Acvrl外顯子7包括導致Acvrl蛋白中的R258G氨基酸變異的改變。