[發明專利]一株唾液乳桿菌菌株及其應用

有效

• 申請號: 201310209500.1
• 申請日: 2013-05-30
• 公開（公告）號: CN103289926A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 王云峰;崔紅玉;趙妍
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所;哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/16;C12R1/225
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

技術領域

本發明涉及一株唾液乳桿菌菌株，還涉及該唾液乳桿菌菌株在制備促進動物生長的藥物中的應用，屬于微生物領域。

背景技術

唾液乳酸桿菌（Lactobacillus?salvarius）是乳桿菌屬的重要成員之一，大多數為動物體表和內部黏膜表面的益生菌之一。益生性乳桿菌（LAB）是人和動物腸道、呼吸道、生殖道及皮膚黏膜系統的正常菌群，許多研究成果發現乳桿菌和腸黏膜共同組成保護屏障，防止病毒、細菌等的侵入，人類越來越清晰地認識到益生菌對人類和動物生命健康的重要作用，大量現代免疫學研究結果已經證實益生菌（尤其是乳桿菌）對動物細胞免疫、體液免疫及腸黏膜局部免疫的調節功能，以及對免疫系統發育和免疫穩態的決定作用；并具有抑制腫瘤和抗癌作用等，使益生乳桿菌近年來一度成為現代功能食品、動物飼料添加劑、醫學領域的研究熱點之一，甚至成為現代固有免疫學領域的研究熱點。

一系列研究表明，如果沒有益生菌，人和動物的免疫系統絕不能發育成為正常的免疫系統。益生乳桿菌不僅可以有效調節黏膜免疫系統、有效促進分泌型sIgA的分泌，而且還可以調節黏膜的菌群分布，促使某些病原體發生凝聚，并阻止其粘附在黏膜上，以防止其進一步的侵入，并且益生菌吸附在黏膜表面（包括腸黏膜和呼吸道黏膜），能夠降解粘性蛋白并利用這種內源性的營養可以基本保持數量穩定，這種粘附可以與黏膜免疫系統發生作用，可以有效地刺激黏膜免疫系統，起到免疫調節作用，從而使黏膜免疫系統處于合適的穩定的激活狀態（免疫穩態），進而有利于抵御外來病毒或細菌的入侵。因此乳桿菌的合理存在和適當刺激，可以提高黏膜免疫系統的防御功能，從而有效的阻止病毒的吸附和侵入。

存在于胃腸道黏膜、口腔呼吸道黏膜及生殖道表面的益生菌作為一種活的常駐菌體對腸道黏膜及呼吸道黏膜具有雙重的保護作用，一方面它可以在黏膜表面內附著定植，維護胃腸道及呼吸道黏膜微生物菌群平衡；另一方面益生菌可直接與宿主的免疫系統尤其是宿主的黏膜免疫系統發生相互作用誘發黏膜免疫；并能夠刺激脾臟、胸腺及法氏囊等免疫中樞器官的發育，還可以促進巨噬細胞發揮佐劑作用；通過影響黏膜系統細胞因子等的合成和分泌，從而增強T、B細胞對抗原刺激的反應性能，有效增強特異性免疫作用；黏膜表面常駐益生菌可以活化黏膜內的相關淋巴組織，增加sIgA生物合成，提高消化道黏膜及呼吸道黏膜免疫功能，通過誘導淋巴細胞和巨噬細胞產生細胞因子，發揮免疫調節作用，從而增強機體免疫功能。但是，目前乳桿菌最大的缺點是生命力十分脆弱，無法久存。研究發現，乳桿菌必須在腸道特定部位才能產生功效。而天然乳桿菌不耐高溫、胃酸及膽鹽的侵蝕，經飼料制粒后大多數乳桿菌會死亡，很難通過胃環境安全到達腸道發揮作用。

發明內容

針對現有技術中的不足，本發明提供了一種唾液乳桿菌，具有耐酸、耐膽鹽的特性。

本發明通過以下技術方案實現的：

本發明菌株分離自中國新疆天山山脈中段，人跡罕至、植被茂密的地表腐殖土層，經MRS接種培養、分離純化后獲得一株唾液乳桿菌菌株（菌株號為HVRIC5），其微生物保藏號為CGMCC?No.6787；保藏日期：2012年11月7日；其分類命名為：乳桿菌屬唾液乳酸桿菌（Lactobacillus?salvarius）；保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏地址：北京市朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所。

本發明主要通過以下方法從來自于中國新疆天山山脈中段，人跡罕至、植被茂密的地表腐殖土層中分離得到上述唾液乳桿菌菌株。

將采集的野生雞糞便直接接種于MRS液體選擇培養基中進行細菌增殖富集，再接種至MRS固體選擇培養基，挑取特征明顯的菌落反復劃線分離，直至分離出形態、大小一致的菌落，進行革蘭氏染色，對菌體形態進行顯微觀察。反復接種純化后，即得。

經法國梅里埃公司API50CH鑒定系統進行菌種判定，本發明所分離得到的唾液乳桿菌菌株HVRIC5的分類地位屬于：乳桿菌屬唾液乳酸桿菌（Lactobacillus?salvarius）。

該菌株在MRS平板上的菌落為半球形，表面光滑濕潤，呈乳白色，直徑約為1-2mm，大小均一；革蘭氏染色觀察，該菌株為典型革蘭氏陽性，顯微鏡下菌體為不太規則的粗大桿狀，兩端鈍圓，無芽孢；在MRS液體培養基中生長良好，呈均勻渾濁生長，12小時在試管底部出現白色沉淀。最適生長溫度為37℃，適宜pH為4.5-7.0，能在質量分數為5%氯化鈉肉湯中生長。本發明的唾液乳桿菌（Lactobacillus?salvarius）HVRIC5菌株可以用于調節動物腸道菌群，促進動物生長。