[發明專利]一種表達新城疫病毒F蛋白的傳染性喉氣管炎重組病毒株及其構建方法和應用

在審

• 申請號: 201911420496.7
• 申請日: 2019-12-31
• 公開（公告）號: CN111041004A
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 劉勝旺;邵昱昊;韓宗璽;孫軍峰
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所(中國動物衛生與流行病學中心哈爾濱分中心)
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/63;C12N15/66;C07K14/125;A61K39/295;A61K39/17;A61K39/245;A61P31/20;A61P31/14
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

一種表達新城疫病毒F蛋白的傳染性喉氣管炎重組病毒株及其構建方法和應用，屬于重組病毒疫苗技術領域。本發明針對傳染性喉氣管炎外源免疫原基因的重組病毒構建和應用的問題，本發明提供了一種傳染性喉氣管炎病毒重組疫苗株，命名為rILTV△gC?NDV?F，微生物保藏號是：CGMCC No.18534，該病毒株是用新城疫病毒F基因(NDVF)替換傳染性喉氣管炎病毒非必須基因gC基因，構建獲得缺失gC基因并在其相應位置插入NDVF表達盒的重組新城疫病毒F蛋白的傳染性喉氣管炎病毒，本發明獲得的重組傳染性喉氣管炎病毒株可用于制備預防雞傳染性喉氣管炎和新城疫的活載體疫苗。

技術領域

本發明具體涉及一種表達新城疫病毒F蛋白的傳染性喉氣管炎重組病毒株及其構建方法和應用，屬于重組病毒疫苗技術領域。

背景技術

傳染性喉氣管炎(InfectiousLaryngotracheitis,ILT)是由傳染性喉氣管炎病毒(InfectiousLaryngotracheitisvirus,ILTV)引起一種雞急性上呼吸道病毒性傳染病。傳染性喉氣管炎病毒主要感染雞呼吸系統，尤其是氣管上皮是病毒主要繁殖場所。感染雞發病時表現為張口呼吸、咳血、結膜炎、流淚等癥狀，部分強毒感染致死率達100％。本病1925年在美國首次報道后，現已遍及世界許多養雞地區。本病傳播快，死亡率較高，在我國較多地區發生和流行，給養雞業造成巨大經濟損失，是危害養雞業的重要疫病之一。

傳染性喉氣管炎病毒的自然感染僅限于雞，幼齡火雞、野雞、鵪鶉和孔雀也可感染，但以成年雞癥狀最為特征。鴨、鴿、珍珠雞、麻雀及所有哺乳動物不易感。病雞、康復后的帶毒雞和無癥狀的帶毒雞是主要傳染來源。傳染性喉氣管炎病毒與其它皰疹病毒一樣，ILTV的潛伏和激活都可以引起該病在雞群中爆發。病毒的感染與品種、年齡和性別無關，成年雞感染率較幼齡雞高。本病一旦傳入雞群，則迅速傳開，感染率可達90％以上，死亡率一般在10％以上，部分強毒死亡率達到70％。傳染性喉氣管炎病毒只有一個血清型，免疫接種是防治該病的最有效手段。目前國內外預防傳染性喉氣管炎使用較廣泛的是弱毒疫苗，此類疫苗具有免疫效果好、免疫保護力產生快的特點，給雞群進行免疫接種能有效預防該病。然而，隨著畜禽集約化養殖業的發展，單價疫苗已顯示出其一定的弊端，多次免疫的防控措施費時費力，多價聯合疫苗便成為養殖業最受歡迎的疫病防控產品，因而開展雞病多價聯合疫苗成為必然選擇。

ILTV屬皰疹病毒科，皰疹病毒甲亞科，傳喉炎病毒屬，禽皰疹病毒I型(Herpesviridae，Alphaherpesvirinae，Iltovirus Gallid，herpesvirus 1)。其基因組為雙股線性DNA，大小約155kb，基因組具有典型的皰疹病毒結構，具有典型的皰疹病毒D型結構。皰疹病毒基因組包含大量的復制非必需基因，包括TK、gC、gG、gK、US1、US2、US9、UL41、UL42、US7和US8等。在相關研究中將外源基因插入或替代皰疹病毒的非必須基因，構建重組病毒疫苗，這被認為是一種良好的重組活疫苗病毒載體，目前有關皰疹病毒作為載體的報道包括偽狂犬病載體、傳染性喉氣管炎病毒載體、馬力克氏病毒載體以及火雞皰疹病毒載體等。隨著對傳染性喉氣管炎病毒研究的不斷加深，以ILTV為病毒活載體受到更加廣泛的關注，ILTV作為載體的優勢在于該病毒宿主范圍較窄，對鴨、鴿、珍珠雞、麻雀及所有哺乳動物均不易感，無致病性，因此即使這些非自然宿主呼吸道瞬時增殖也不會對人和其他動物的健康安全造成影響，這對開發ILTV病毒活載體疫苗具有重要意義。