[發明專利]一種檢測水果灰霉菌感染程度的方法和裝置

有效

• 申請號: 201911349346.1
• 申請日: 2019-12-24
• 公開（公告）號: CN111122658B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 羅自生;徐艷群;李莉;章曉晨;童志超
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N27/00
• 分類號: G01N27/00;G01N30/02;G01N30/86;C12Q1/6851
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

本發明公開了一種檢測水果灰霉菌感染程度的方法和裝置，屬于水果保鮮技術領域，該方法中通過對水果感染灰霉菌后的揮發性物質進行檢測，并將水果感染灰霉菌的程度進行劃分；以檢測到的揮發性物質的含量為自變量x，以水果感染灰霉菌的程度為應變量y作圖，求出x，y的函數關系；以檢測到的揮發性物質作為檢測指標設計電子鼻檢測裝置，對水果感染灰霉菌后的揮發性物質的含量進行檢測；將檢測到的揮發性物質的含量代入函數關系中，得出水果感染灰霉菌的程度。本發明所提供的檢測水果灰霉菌感染程度的方法中通過測定水果揮發性物質的種類及含量，排查水果是否感染灰霉菌，有利于控制灰霉菌的進一步擴散，能更好的保護水果的品質。

技術領域

本發明涉及水果保鮮技術領域，具體涉及一種通過測定揮發性物質組分檢測水果灰霉菌感染程度的方法和裝置。

背景技術

灰霉菌(Botrytis cinerea)，又稱灰葡萄孢菌，是一種廣寄主性的、能夠引起多種植物幼苗、水果及儲藏器官的猝倒、落葉、花腐、爛果及爛窖，潮濕環境中灰霉菌病部表層產生大量的灰色霉層(分生孢子梗和分生孢子)，稱為灰霉病，其在空氣中廣泛分布，不僅能夠感染田間作物，同樣會給植物的采后階段造成巨大損失。

據統計，高達25％的水果腐敗都是由灰霉菌引起的，灰霉菌對水果中成熟或衰老的組織破壞最大；在水果種植過程和貯藏運輸過程中，如果有些水果感染了灰霉菌，這些灰霉菌會產生更多的孢子，進而感染周邊健康的水果，因此，對灰霉病的發病情況進行監控對于及時控制病害是非常有必要的。

水果中灰霉病的檢測方法主要是通過設計特異性引物使灰霉菌基因進行聚合酶鏈式反應(PCR)擴增，從而對灰霉菌進行檢測，該方法需要使用較為復雜的PCR儀器及生化試劑，并且需要經歷提取樣本的RNA，將RNA反轉錄成cDNA后再進行PCR擴增-跑膠或實時熒光檢測等步驟，操作過程復雜，持續時間長。

因此，研究人員致力于研發出快速、高效、便捷的檢測方法或儀器對水果感染灰霉菌的程度進行實時檢測。研究發現一些典型的揮發性化合物，如具有泥土味、蘑菇味的1-辛-3-醇就是由灰霉菌產生的，(Morales Valle等人，2010，Micro-extraction and GasChromatography/Mass Spectrometry for improved analysisof geosmin and otherfungal“off”volatiles in grape juice.Journal of Microbiological Methods 83(1),48-52)；在受到外界脅迫時，包括生物脅迫如病蟲害和非生物脅迫如紫外輻照時，水果自身的揮發性物質會相應發生變化，這些揮發性物質作為植物特殊的信號分子，參與到植物與病原菌、植物與病蟲害、以及植物與植物之間的互作當中。

研究發現，當植物受到蟲害感染時，其自身有一系列醛類、萜類揮發性物質的揮發性物質含量會上調(Obara,N.,M.Hasegawa and O.Kodama(2002).Induced volatiles inelicitor-treated and rice blast fungus-inoculated rice leaves.Bioscience,Biotechnology and Biochemistry 66(12):2549-2559)，理論上講，當水果遭受到灰霉菌感染時，其自身的揮發性物質會有所變化，通過對水果中的高通量揮發性物質進行分析，可以判斷水果是否感染了灰霉菌以及感染程度如何。

目前，現有的對揮發性物質進行分析的方法主要有將氣相色譜法與火焰離子化檢測器(GC-FID)相結合，或在需要鑒定揮發性物質種類時將質譜儀(GC-MS)與頂空固相微萃取(HS-SPME)相結合；這類分析技術總的運行時間較長，價格昂貴，無法在水果和食品的檢測中廣泛應用。

發明內容

本發明提供了一種檢測水果灰霉菌感染程度的方法，該方法通過測定水果揮發性物質的組分，提前排查水果是否感染灰霉菌，有利于控制灰霉菌的進一步擴散，能更好的保護水果的品質。