[發明專利]一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽

在審

• 申請號: 201911342820.8
• 申請日: 2019-12-24
• 公開（公告）號: CN111748596A
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 孫坤來;陳蔭;趙玉勤;王斌;張譯文
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/16;C07K1/20;A23L33/18;A61K38/01;A61P1/16
• 代理公司: 杭州知杭知識產權代理事務所(普通合伙) 33310
• 代理人: 陳麗嫦

1.一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，包括以下步驟：

S1、桑葚制干：將新鮮采摘的桑葚冷凍干燥機內凍干，制得桑葚制干產品，待用；

S2、粉碎：將桑葚制干產品置于粉碎機中充分粉碎后過篩，制得桑葚粉末，待用；

S3、制備混合液：向桑葚粉末中添加氯化鈉溶液，制得混合液，待用；

S4、制備桑葚酶解產物：用堿性蛋白酶酶解混合液，待用；

S5、分離：利用Sephadex G-25凝膠色譜進行分離，待用；

S6、進一步分離：以蒸餾水為洗脫液，流速0.5-0.8mL/min，收集洗脫組分并測定214nm波長處的吸光值，繪制洗脫曲線，收集洗脫峰，將具有抗氧化活性的峰，利用反相高效液相色譜RP-HPLC進一步分離，待用；

S7、冷凍干燥：在真空下冷凍干燥，制得抗氧化肽。

2.根據權利要求1所述的一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，在步驟S1中，所述冷凍溫度為10-15℃，冷凍干燥時間為10-12h。

3.根據權利要求1所述的一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，在步驟S2中，粉碎后過60目篩。

4.根據權利要求1所述的一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，在步驟S3中，所述桑葚粉末和氯化鈉溶液按照重量份為1:2的比例添加，所述氯化鈉溶液的濃度為1.0%。

5.根據權利要求1所述的一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，在步驟S4中，所述酶解條件為：pH8.0-9.0、酶添加量3500-5000 U/g、底物濃度4%-5%w/v、解酶時間6-8h，沸水浴20-35min滅活，經8000-9000rpm離心20-30min，取上清液冷凍干燥，即為桑葚酶解產物。

6.根據權利要求1所述的一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，在步驟S5中，所述RP-HPLC的洗脫梯度為65-80min、10%-20% V乙腈，收集保留時間為40min的洗脫峰。

7.根據權利要求1所述的一種具有肝損傷保護作用的抗氧化肽，其特征在于，在步驟S7中，所述真空度為0-1.0MPa，冷凍干燥溫度為10-20℃，冷凍干燥時間為18-20h。