[發明專利]一種沙棘籽粕非可溶性蛋白測定的前處理方法

有效

• 申請號: 201911304138.X
• 申請日: 2019-12-17
• 公開（公告）號: CN110907652B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 歐陽健;王洪倫;王繼飛
• 申請（專利權）人: 湖州中科高原生物創新中心
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;C12P21/06
• 代理公司: 成都華風專利事務所(普通合伙) 51223
• 代理人: 杜朗宇

本發明提供的一種沙棘籽粕非可溶性蛋白測定的前處理方法，主要包含以下步驟：（1）沙棘籽粕粉碎，備用；（2）沙棘籽粕醇提預處理，液料比15:1~25:1、醇體積分數65%~75%、預處理時間25~35min、預處理溫度50~60℃、3次，過濾，得沙棘籽粕醇提渣，45~55℃干燥，粉碎，過50目篩，備用；（3）沙棘醇提渣、胰蛋白酶、氫氧化鈉水溶液按比例充分混勻，料液比1:44、蛋白酶添加量為1.4%、氫氧化鈉水溶液pH為12.3，60℃恒溫水浴提取3次，每次30min，合并離心得上清液，進行蛋白含量測定，計算即得沙棘籽粕非可溶性蛋白含量。

技術領域

本發明涉及一種沙棘籽粕非可溶性蛋白測定的前處理方法。

背景技術

沙棘（Hippophae rhamnoides L.），又名醋柳、黃酸刺、黑刺、酸刺，胡頹子科、沙棘屬的落葉灌木或喬木，為藥食兩用植物。沙棘起源于青藏高原，因其極強的生態適應性，在亞歐大陸的溫帶、寒溫帶以及亞熱帶高原山區有廣泛分布。我國是沙棘資源量最大的國家，在三北地區大量栽培，共有沙棘林140萬公頃，占世界沙棘總面積的95%。沙棘籽粕為沙棘籽經萃取油脂后的固體廢料，但籽粕中仍含有大量蛋白質，可作蛋白質提取原料，而我國沙棘行業每年產生約26.3萬噸籽粕，對這部分生物 資源的高值化利用具有良好的市場前景和生態價值。

目前，沙棘籽粕蛋白的測定主要為可溶性蛋白，而沙棘籽粕非可溶性蛋白的準確測定有沒相應的技術方案。在文獻“果渣營養價值及其發酵飼料在畜禽養殖中的應用”（田志梅,馬現永,魯慧杰,崔藝燕,王剛.中國畜牧獸醫,2019,46(10):2955-2963.）中沙棘渣粗蛋白含量17.45%~26.06%，文獻“沙棘籽粕蛋白的堿酶兩步法提取工藝及功能性研究”（凌孟碩,崔淼,趙晨偉,唐年初. [J].食品工業科技,2012,33(17):240-244.）中沙棘籽粕蛋白含量為38.66%，采用的方法為GB/T 5009.5。由此對比，可充分顯示，現有技術方案缺乏對沙棘籽粕非可溶性蛋白測定的關注，亦不能準確表征或測定沙棘籽粕非可溶性蛋白的含量與特征，這主要與沙棘籽粕非可溶性蛋白的前處理方法相關。

本發明提供了一種沙棘籽粕非可溶性蛋白測定的前處理方法，可實現沙棘籽粕非可溶性蛋白的直接測定，并為沙棘籽粕非可溶性蛋白的特性研究與應用提供基礎。

發明內容

本發明提供的一種沙棘籽粕非可溶性蛋白測定的前處理方法，主要包含以下步驟：（1）沙棘籽粕粉碎，備用；

（2）沙棘籽粕醇提預處理，液料比15:1~25:1、醇體積分數65%~75%、預處理時間25~35min、預處理溫度50~60℃、3次，過濾，得沙棘籽粕醇提渣，45~55℃干燥，粉碎，過50目篩，備用；

（3）沙棘醇提渣、胰蛋白酶、氫氧化鈉水溶液按比例充分混勻，料液比1:44、蛋白酶添加量為1.4%、氫氧化鈉水溶液pH為12.3，60℃恒溫水浴提取3次，每次30min，合并離心得上清液，進行蛋白含量測定，計算即得沙棘籽粕非可溶性蛋白含量。

進一步地，如步驟（2）所述，沙棘籽粕與醇液料比為15:1~25:1，優選地為20:1。

進一步地，如步驟（2）所述，醇為體積分數為65%~75%的甲醇或乙醇，優選地為70%的乙醇。

進一步地，如步驟（2）所述，預處理時間為25~35min，優選地預處理時間為30min。

進一步地，如步驟（2）所述，預處理溫度為50~60℃，優選地預處理溫度為55℃。

進一步地，如步驟（2）所述，沙棘籽粕醇提渣干燥溫度為45~55℃，優選地干燥溫度為50℃。

蛋白質含量測定：