[發明專利]裂殖壺菌的發酵生產方法

有效

• 申請號: 201911293347.9
• 申請日: 2019-12-16
• 公開（公告）號: CN110923271B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 王兆偉;彭小偉
• 申請（專利權）人: 寧波浮田生物技術有限公司
• 主分類號: C12P7/6434
• 分類號: C12P7/6434;C12R1/645
• 代理公司: 寧波方向同行專利商標代理事務所(普通合伙) 33497
• 代理人: 汪建華

1.一種裂殖壺菌的發酵生產方法，其特征在于，包括：

1)滸苔水解液制備的步驟：

干滸苔的粉碎：將干滸苔用粉碎機粉碎，以得到干滸苔粉；

滸苔水解：向水解罐內加入干滸苔粉和水，根據設定的實驗條件對滸苔進行水解，以得到滸苔水解物料；

水解液過濾：將水解物料打入板框壓濾機以進行固液分離，依設定的過濾條件，對所得濾液進行過濾，以得到水解液；

2)發酵培養基與流加培養基制備的步驟：

將滸苔水解液與其他營養物質配置成發酵培養基和流加培養基，滅菌后進行裂殖壺菌的發酵生產；

3)發酵體系設置的步驟：

發酵罐體系中，裂殖壺菌種子的接種量為5-10％；采用流加補料方式進行發酵，包括：

0-12h，不補料，培養溫度20-25℃；通氣量為0.5-1vvm；100-150rpm；

12-24h，補料液，料液組成：滸苔水解液350-500mL/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂4.5g/L，硫酸鉀12g/L，硫酸鈉15g/L；勻速補料，補料總體積為發酵液體積的1/20-1/15；培養溫度20-25℃；通氣量為0.5-1vvm；100-150rpm；

24-96h，補料液，料液組成：滸苔水解液350-500mL/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂4.5g/L，硫酸鉀12g/L，硫酸鈉15g/L；勻速補料，補料總體積為發酵液體積的1/5-1/4；發酵溫度28-32℃；通氣量為1-2vvm；50-80rpm；

96-100h，發酵液中補入NaAc和FeSO4，使發酵液中NaAc?0.1-0.5g/L，FeSO4?0.05-0.1g/L；發酵溫度20-22℃；通氣量為0.1-0.3vvm；30-50rpm；

4)收集和干燥的步驟：

發酵結束后，將裂殖壺菌發酵液用離心機進行分離，再經噴霧干燥塔噴霧干燥后獲得的干粉即為裂殖壺菌干粉。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中滸苔的水解條件為：向水解罐內加入質量比為1:1的干滸苔粉和水，加入終濃度分別為10-15g/L的碳酸氫鈉和2-5g/L的氫氧化鈉，壓力升至0.1-0.20MPa，加熱至30-60℃，保溫時間40min-80min，冷卻后用硫酸或磷酸調節pH至6.5-7，即得滸苔水解物料。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，碳酸氫鈉和氫氧化鈉的添加量分別為12-14g/L和4-5g/L，加熱溫度為50-55℃，保溫時間50-60min。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中的過濾條件為：板框壓濾機的有效過濾面積為80-100m²，采用100-600目濾布，過濾溫度20-80℃，過濾壓力0.05-0.4Mpa；所得濾液為滸苔水解液。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，水解液過濾條件為：采用250-300目濾布，過濾溫度50-55℃，過濾壓力0.2-0.3Mpa。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中，發酵培養基為：淡水配置，滸苔水解液50-500mL/L，磷酸二氫鉀1g/L，硫酸鎂1.5g/L，硫酸鉀4g/L，磷酸鈉5g/L；流加培養基：淡水配置，滸苔水解液250-750mL/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂4.5g/L，硫酸鉀12g/L，磷酸鈉15g/L。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述發酵培養基的配方為：滸苔水解液300-400mL/L，磷酸二氫鉀1g/L，硫酸鎂1.5g/L，硫酸鉀4g/L，磷酸鈉5g/L，補料培養基的配方為：滸苔水解液500-600mL/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂4.5g/L，硫酸鉀12g/L，磷酸鈉15g/L。