[發明專利]一種呋塞米原料藥及其注射液有關物質的高效液相色譜分析方法

有效

• 申請號: 201911287413.1
• 申請日: 2019-12-14
• 公開（公告）號: CN112986469B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 徐奧;何凱峰;江華;金牮;陳寅;李瑞芳;李明
• 申請（專利權）人: 武漢久安藥業有限公司;江蘇諦奇醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 武漢卓越志誠知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42266
• 代理人: 戴寶松

本發明公開了一種呋塞米原料藥及其注射液有關物質的高效液相色譜分析方法，該方法采用反相色譜柱及紫外檢測器，通過調節流動相組成、比例、pH值、無機鹽濃度及洗脫方式，并以甲醇?磷酸鹽緩沖液為流動相，乙腈與水、磷酸的混合溶液為稀釋劑，進行梯度洗脫。本發明首次實現了呋塞米原料藥及其注射液中6種雜質的高效分離及高靈敏度測定，且本發明所提供的方法中呋塞米主峰與相鄰雜質峰及各雜質峰之間的分離度均大于2，從而為呋塞米原料及其注射液的質量控制分析提供了準確、可靠的分析方法，提高了呋塞米的質量控制要求，保證了呋塞米的有效性和安全性。

技術領域

本發明屬于分析檢測技術領域，涉及呋塞米及其注射液的分析方法，尤其涉及一種呋塞米原料藥及其注射液有關物質的高效液相色譜分析方法。

背景技術

呋塞米(Furosemide)又稱為呋喃苯胺酸、速尿，是一種廣泛應用于治療充血性心力衰竭和水腫的袢利尿藥，通過抑制髓袢升支粗段髓質和皮質部以及遠端腎小管對電解質的重吸收，抑制近端腎小管對Na⁺、Cl^-的重吸收，從而導致水、Na⁺、Cl^-排泄增多，產生利尿作用。臨床廣泛用于治療與心力哀竭有關的水腫，包括肺水腫以及相關腎臟和肝臟疾病，也可以單獨或與其他抗高血壓藥物聯合使用治療高血壓。其化學名稱為2-[(2-呋喃甲基)氨基]-5-(氨磺酰基)-4-氯苯甲酸，分子式為C₁₂H₁₁ClN₂O₅S，其化學結構式如下：

呋塞米是一種化學性質穩定的物質，其對溫度和濕度相對穩定。然而在高溫條件下，呋塞米會在酸性溶液中發生熱降解。其苯環4位上的亞氨基官能團易水解，尤其在酸性條件下(pH＜pKa)，亞氨基官能團上的氮被質子化后對糠基碳進行親核攻擊，從而生成降解產物雜質C(歐洲藥典)，且在光照及高溫條件下會加速4位上亞氨基官能團的水解；此外，呋塞米對光也較為敏感，即使在無氧條件下仍會發生光解，光解的產物主要是脫氯聚合；據歐洲藥典報道：在呋塞米中可能檢測到的雜質包括雜質A、雜質B、雜質C、雜質D、雜質E、雜質F。

上述已知雜質的結構式分別如下：

雜質A

雜質B

雜質C/

雜質D

雜質E

雜質F

目前國內外對上述已知雜質的檢測已有許多的研究報道，如中國藥典、美國藥典及日本藥典均指出可采用四氫呋喃-水-冰醋酸(70：30：1)作為流動相，以實現呋塞米與有關雜質之間的分離及定量測定。然而，該方法難以實現呋塞米與所有已知雜質之間的有效分離、且流動相刺激性大、同時該方法中由于有機相的比例大且揮發性強，從而存在耐用性較差等問題，限制了其應用發展。歐洲藥典及英國藥典中提出將0.2g磷酸二氫鉀和0.25g西曲溴銨溶于70mL水中(并用氨水調節pH至7.0)，同時加入30mL丙醇作為流動相，以實現呋塞米與有關雜質之間的分離及定量測定。然而，該方法亦存在難以實現呋塞米與所有已知雜質之間有效分離、且存在離子對試劑會使色譜柱變性等問題。此外，由于呋塞米對光不穩定，尤其在酸性條件下對光極其敏感，因此會降解生成諸多雜質，從而會使藥品中存在雜質含量不明確、雜質來源不明、雜質種類不清晰等情況，從而給篩查的目標選擇帶來了較高的難度。

因此，亟需提供一種呋塞米原料藥及其注射液有關物質的高效液相色譜分析方法，以實現呋塞米與有關雜質之間的高效分離及高靈敏度測定，從而為呋塞米原料及其注射液的質量控制提供有利保障。

發明內容