[發明專利]一種多糖改性的無細胞基質復合材料、制備及應用

有效

• 申請號: 201911258795.5
• 申請日: 2019-12-10
• 公開（公告）號: CN110960729B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 曹成波;王倩;孫偉;朱忠強;孫永強
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/56
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 張曉鵬

本發明屬于無細胞基質技術領域，具體涉及一種多糖改性的無細胞基質復合材料、制備及應用。將新鮮的膀胱基質經脫脂、堿處理、酶處理及凍融四步無細胞處理后，與多糖復合，利用多糖上的多個氨基與無細胞膀胱上的活性基團形成交聯，提高材料的三維纖維網絡結構穩定性，同時將多糖接枝到無細胞膀胱材料中，從而賦予無細胞基質材料優良生物相容性。其中，多糖包括殼聚糖、透明質酸及硫酸軟骨素。本發明采用四步無細胞處理、多糖復合、無毒交聯等方法制備改性無細胞膀胱基質復合材料，可用于構建再生性角膜材料、膀胱材料、口腔修復膜等組織再生修復材料。

技術領域

本發明屬于無細胞基質技術領域，具體涉及一種多糖改性的無細胞基質復合材料、該復合材料的制備方法及應用。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本公開的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

無細胞膀胱基質取材于異種生物，具有來源廣泛、成本低廉、低免疫原性、以及功能上類似于膀胱等優點，是膀胱修復的熱點材料。但現有無細胞方法制備的無細胞豬膀胱基質材料存在機械性能差、滲尿、降解不可控、生物相容性不佳等缺點，此外，由于無細胞過程中化學試劑的使用，破壞了膀胱中原有的生物活性因子，降低了無細胞膀胱基質誘導組織再生的能力。

殼聚糖具有優良的生物相容性、生物降解性、殼聚糖在植入體內后，可刺激免疫細胞分泌細胞因子、免疫因子，加速細胞增殖、加快植入的支架材料與組織融合。在體內溶菌酶的作用下，殼聚糖會緩慢降解成為寡糖、單糖，被人體吸收，復合殼聚糖可使基質的孔隙率降低，從而降低修復時漏尿的可能。硫酸軟骨素廣泛存在于細胞外基質和細胞表面，具有抗凝血作用，在無細胞的過程中會導致硫酸軟骨素的流失，導致無細胞膀胱基質性能下降，將其復合在基質上可增強基質的生物相容性，從而促進細胞的粘附增殖，誘導組織再生。透明質酸廣泛存在于組織器官上，具有保護細胞不受病菌侵害，防止感染，加快創傷恢復的作用。無細胞膀胱基質復合透明質酸后可調控膠原的生成，減少移植物攣縮的發生。發明人的以往研究中，提供了一種通過復合水溶性多糖對無細胞真皮基質材料進行改性修飾的方法，修飾后復合材料可用于制備生物輔料、復合移植支架等，具有良好的力學性能。

理想的膀胱修復材料應至少具備以下特征：1.具有良好的生物相容性，不會引起免疫排斥，2.有足夠的機械性能，使膀胱在充盈和排空尿液時不破裂，3.能夠有效防止尿液的滲透，避免尿液滲透侵蝕周圍組織，4.可誘導血管和組織的新生，5.具有適宜的降解速率。但現有方式制備的無細胞膀胱基質普遍存在滲尿、機械強度低、易降解等缺點，故需開辟新思路和新制備工藝，制備具有優良理化性能的改性無細胞膀胱基質組織工程修復材料。

發明內容

針對上述研究背景，發明人認為通過改性增加無細胞膀胱基質的機械強度，可以有效的降低無細胞膀胱材料的滲漏率，可應用于膀胱修復等。針對目前采用的無細胞膀胱基質存在的不足，本發明通過改性和交聯處理膀胱，可降低其抗原性，提高其抗降解性及生物相容性，并增強其誘導組織再生的能力，具有巨大的應用前景。針對該研究成果，本發明提供以下技術方案：

第一方面，提供一種改性無細胞膀胱基質復合材料的制備方法，所述制備方法包括對膀胱組織進行無細胞處理及采用水溶性多糖對無細胞處理后的膀胱基質進行復合的步驟，所述無細胞處理包括采用堿液、表面活性劑及蛋白酶進行處理。

優選的，所述無細胞處理具體步驟如下：

按照料液比3~5:1向去除脂肪、筋膜的膀胱組織中加入堿液及表面活性劑成分作用一段時間；通過鹽溶液及酸液對膀胱組織進行脫堿；向脫堿后的豬膀胱中加入蛋白酶脫除殘余細胞后凍融。

進一步優選的，所述堿液為混合表面活性劑后的堿液。

在一些具體的實施例中，所述表面活性劑為Trition X-100或SDS，所述堿為NaOH。

在一些具體的實施例中，所述表面活性劑的濃度為0.3%-0.4%。