[發明專利]細胞外基質底物反應蛋白1在制備診斷和預測卵巢癌試劑中的應用

在審

• 申請號: 201911256160.1
• 申請日: 2019-12-10
• 公開（公告）號: CN112946290A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 莊光磊;狄文;殷霞;師凱旋
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574;G01N33/543
• 代理公司: 上海申浩律師事務所 31280
• 代理人: 趙青

本發明涉及醫療診斷技術領域，具體是細胞外基質底物反應蛋白1在制備診斷和預測卵巢癌試劑中的應用及細胞外基質底物反應蛋白1化學發光檢測試劑盒。本發明優點在于：本發明首次發現細胞外基質底物反應蛋白1蛋白作為新的卵巢癌診斷標志物，對于卵巢癌的診斷和預測具有關鍵意義；本發明采用磁微粒化學發光法進行試劑盒開發，相較于酶聯免疫技術，有助于提高檢測靈敏度和操作便捷性，同時，也有助于后期配套自動化檢測儀器的檢測產品的開發。

技術領域

本發明涉及醫療診斷技術領域，具體地說，是Spondin 1(細胞外基質底物反應蛋白1，Spondin 1extracellular matrix protein)在制備診斷和預測卵巢癌的試劑或試劑盒中的應用，還涉及Spondin 1化學發光檢測試劑盒。

背景技術

CA125是一種診斷卵巢癌和檢測其復發常用的指標之一，但患者發病早期CA125往往檢測不到，其臨床應用存在一定局限性。鑒于此，研究者希望能發現一種更有效的標志物，用于卵巢癌的診斷和預測。

傳統的蛋白標志物檢測技術仍為酶聯免疫檢測技術，存在操作復雜、信號不穩定、結果判定不準確等特點。

中國專利文獻CN102735846A公開了一種卵巢癌腫瘤標志物HE4化學發光免疫檢測試劑盒，同時還公開了采用該卵巢癌腫瘤標志物HE4化學發光免疫檢測試劑盒檢測卵巢癌腫瘤標志物HE4的方法。該卵巢癌腫瘤標志物HE4化學發光免疫檢測試劑盒包括9F3抗體包被的微孔板、堿性磷酸酶標記的10E1抗體、分析緩沖液、底物工作液、發光底物、洗滌液、質控品。該發明提供的卵巢癌腫瘤標志物HE4化學發光免疫檢測試劑盒，線性范圍為0.5納克/毫升～1200納克/毫升，檢測限為0.2納克/毫升，可用于卵巢癌的臨床輔助診斷、療效觀察及預后判斷。但是關于Spondin 1在制備診斷和預測卵巢癌的試劑或試劑盒中的應用目前還未見報道。

發明內容

本發明的目的在于提供Spondin 1蛋白在制備診斷和預測卵巢癌的試劑或試劑盒中的應用，闡釋新的蛋白標志物Spondin 1對于卵巢癌的診斷和預測的意義，并采用化學發光法開發蛋白標志物Spondin 1的檢測試劑盒。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案：闡釋Spondin 1在制備診斷和預測卵巢癌的試劑或試劑盒中的應用，并依此制備相應的Spondin 1磁微粒化學發光檢測試劑盒。

1、采用自行表達Spondin 1蛋白和制備Spondin 1抗體的方式，獲得Spondin 1檢測的原材料。

2、采用蛋白偶聯到磁珠的方式，將Spondin 1捕獲抗體偶聯到磁珠上獲得Spondin1捕獲載體。采用相應的標記方法，將堿性磷酸酶標記到Spondin 1的檢測抗體上，獲得Spondin 18檢測抗體。將Spondin 1標品蛋白進行相應梯度的稀釋，獲得Spondin 1的檢測標品。

3、采用相應例數的正常人和卵巢癌患者血清作為Spondin 1的檢測樣本，用Spondin 1捕獲載體與一定量的樣本混勻反應，再用清洗液將樣本洗去，加入Spondin 1檢測抗體和Spondin 1捕獲載體的Spondin 1蛋白結合，然后清洗出去雜蛋白和未結合檢測抗體，檢測反應底物，在檢測儀器上讀取檢測信號，并將信號值與標曲相對應，獲得對應值，比較正常人和卵巢癌患者間的Spondin 1含量差異。

本發明的第一方面，提供Spondin 1在制備卵巢癌診斷標志物中的應用。

本發明的第二方面，提供Spondin 1在制備診斷和預測卵巢癌的試劑或試劑盒中的應用。

進一步的，所述的診斷和預測卵巢癌的試劑或試劑盒是Spondin 1磁微粒化學發光法檢測試劑或試劑盒。

進一步的，所述的診斷試劑或試劑盒是檢測血漿中Spondin 1的表達量的試劑或試劑盒。