[發明專利]余甘子鞣質部位及口服余甘子鞣質部位后血清中化學成分分析檢測方法

在審

• 申請號: 201911160666.2
• 申請日: 2020-05-07
• 公開（公告）號: CN111337584A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 張蘭珍;吳玲芳;梁文儀;常子豪;張秋楠
• 申請（專利權）人: 北京中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
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本發明提供一種余甘子鞣質部位及口服后血清中化學成分UPLC?MSⁿ分析檢測方法，其具有快速、簡便、靈敏、可同時分離鑒定數量多等優點。

技術領域

本發明涉及一種余甘子鞣質部位及口服后血清中化學成分UPLC-MSⁿ分析檢測方法。

背景技術

通常情況下，藥物活性成分需要吸收入血、到達靶器官并作用于相應靶點后才能發揮藥效。藥效成分可能是經消化道吸收原型入血的成分，也可能是經代謝轉化成的活性代謝產物，這些成分構成了發揮藥效作用的物質基礎，其在體內的動態變化反映了發揮藥效作用的過程。研究藥物的代謝可以為其藥效物質基礎研究提供理論基礎，對于設計合理給藥途徑、給藥劑量和指導臨床應用有重要意義。

余甘子為大戟科余甘子屬植物余甘子Phyllanthus emblica L. 的干燥果實，是一種常用藏藥，其富含鞣質，具有多種藥理活性。目前，尚未發現口服余甘子鞣質部位后血清中化學成分分析檢測報道。此外，由于代謝產物的量很少，分離鑒定代謝產物尤其同時分離鑒定多種代謝產物是具有挑戰的工作。因此，需要一種能夠有效分離鑒定口服余甘子鞣質部位后血清中化學成分的分析檢測方法。

發明內容

發明目的：本發明提供一種余甘子鞣質部位及口服后血清中化學成分UPLC-MSⁿ分析檢測方法，其具有快速、簡便、靈敏、可同時分離鑒定眾多成分等優點。

技術方案：

本發明提供了一種余甘子鞣質部位及口服后血清中化學成分UPLC-MSⁿ分析檢測方法，包括：余甘子鞣質部位供試液制備或口服余甘子部位后血清樣品預處理；進樣檢測，收集數據，解析確認；其中色譜條件為色譜柱為C18色譜柱；和/或柱溫 28-32℃；和/或流速：0.1-0.5 ml·min^-1；和/或檢測波長：268-272nm；和/或流動相：甲醇 - 0.2 % 冰醋酸/水梯度洗脫；質譜條件：MS，ESI：負離子模式；霧化氣流：1.3-1.7L/min；離子源溫度：280-320℃；干燥氣壓力：80-120 kPa；質量掃描范圍：m/z 100～1500。

優選的，余甘子鞣質部位供試液制備：精密稱取余甘子鞣質部位粉末加入溶劑溶解定容，進樣前微孔濾膜過濾。優選的，濃度為0.1-1mg.mL^-1；溶劑為30-80%甲醇水溶液。

優選的，血清樣品預處理：精密量取血清樣品加入內標溶液、緩沖液，混合均勻，加入有機溶劑混合，離心，取上清液吹干，殘渣加入有機溶劑水溶液溶解，離心，取上清液備用。

優選的，有機溶劑為甲醇或乙腈；有機溶劑水溶液為30-80%甲醇或乙腈水溶液；和/或混合方式為渦旋；和/或緩沖液為0.5-3mol.L^-1磷酸-磷酸二氫鉀緩沖溶液；和/或離心轉數為10000-30000 r.min^-1；和/或使用惰性氣體吹干。

優選的，色譜條件為：色譜柱： ACQUITY UPLC BEH C18 ；和/或柱溫：30 ℃；和/或流速：0.3 mL.min^-1；和/或檢測波長：270nm；和/或流動相：甲醇- 0.2% 冰醋酸水，流動相梯度為：0-5min 5-15%甲醇，5-8min 15-25%甲醇，8-10min 25-30%甲醇，10-18min 30-60%甲醇，18-26min 60-90%甲醇，26-30min90-90%甲醇； 30-30.1min 90-5%甲醇；30.1-34min 5-5%甲醇。

優選的，質譜條件為： ESI：負離子模式；霧化氣流：1.5 L/min；離子源溫度：300℃；干燥氣壓力：100 kPa；質量掃描范圍：m/z 100～1500。

優選的，為小鼠灌胃。