[發明專利]一種微囊藻毒素降解菌及其應用

有效

• 申請號: 201911156779.5
• 申請日: 2019-11-22
• 公開（公告）號: CN110791449B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 韓木蘭;許國煥;張麗;謝黎煒;魏逸峰
• 申請（專利權）人: 廣東省微生物研究所（廣東省微生物分析檢測中心）
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A23L5/20;C12R1/01
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 陳潔娣;劉明星

1.微小桿菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11，其保藏編號為：GDMCC No：60779。

2.權利要求1所述的微小桿菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11或其發酵產物在降解微囊藻毒素中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述的發酵產物包括微小桿菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11的發酵液、發酵液濃縮產物、發酵液提取物中的至少一種。

4.一種降解微囊藻毒素的制劑，其特征在于，包含權利要求1所述的微小桿菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11和/或其發酵產物。

5.一種制備權利要求4所述的降解微囊藻毒素的制劑的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）將微小桿菌BIDE11接種到滅菌的EBB液體培養基中進行發酵，獲得發酵液；

2）將發酵液離心，收集菌泥，用生理鹽水再分散，超聲破碎，超濾，取濾液；

3）往濾液中加入無水乙醇沉淀，過濾，收集沉淀物，得到菌體抽提物；

4）往菌體抽提物中加入保護劑，混勻，得到降解微囊藻毒素的制劑；

所述的EBB液體培養基組成為：MgSO₄·3H₂O 1.0 g、KH₂PO₄ 0.5 g、K₂HPO₄ 4.0 g、NaCl1.0 g、CaCl₂ 20 mg、FeSO₄ 5 mg、MnCl₂·4H₂O 5 mg、CuCl₂ 0.5 mg、葡萄糖 2 g、酵母提取物 0.15 g和去離子水 1000 mL。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）菌種活化：將微小桿菌BIDE11劃線至EBB瓊脂試管斜面培養基中，30℃培養24 h；然后轉接到EBB液體培養基中，30℃培養20 h，形成搖瓶液體菌種；

2）擴大培養：將步驟1）得到的液體菌種以5% v/v的接種量轉接到含有EBB液體培養基的30 L種子罐中，發酵溫度30±1℃，攪拌速率100~120 rpm，通氣量0.3 V/V?min，發酵時間為20 h，制成一級種子液；

3）二級擴大培養：將步驟2）得到的一級種子液以5% v/v的接種量轉接到含有EBB液體培養基的300 L發酵罐中進行二級發酵，發酵溫度30±1℃，攪拌速率100~120 rpm，通氣量0.3V/V?min，發酵時間24 h；

4）收集發酵液，4000 RPM離心30 min，收集菌泥，用適量生理鹽水再分散，超聲破碎，超濾，取濾液，往濾液中加入無水乙醇沉淀，收集沉淀物，得到菌體抽提物；

5）往菌體抽提物中加入保護劑，混勻，得到降解微囊藻毒素的制劑；

所述的EBB液體培養基組成為：MgSO₄·3H₂O 1.0 g、KH₂PO₄ 0.5 g、K₂HPO₄ 4.0 g、NaCl1.0 g、CaCl₂ 20 mg、FeSO₄ 5 mg、MnCl₂·4H₂O 5 mg、CuCl₂ 0.5 mg、葡萄糖 2 g、酵母提取物 0.15 g和去離子水 1000 mL。

7.根據權利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述的濾液和無水乙醇按體積比2:1混合。

8.根據權利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述的保護劑為谷胱甘肽。