[發(fā)明專利]一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的小球藻胞外多糖復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201911155767.0
• 申請日: 2019-11-22
• 公開（公告）號: CN110742900B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李玉芹;雷錚宇;周蓉;唐裕芳;祝佳惠;李超;賈淑婷
• 申請（專利權(quán)）人: 湘潭大學(xué)
• 主分類號: A61K31/715
• 分類號: A61K31/715;A61P37/04;A61P29/00;A23L33/125;A61K36/05
• 代理公司: 湘潭市匯智專利事務(wù)所(普通合伙) 43108
• 代理人: 冷玉萍

本發(fā)明公開了一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的小球藻胞外多糖復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的胞外多糖復(fù)合物提取自小球藻Chlorella protothecoides CS?41發(fā)酵液，經(jīng)過濾、離心、濃縮、醇沉、Sevage法除蛋白后，再通過陰離子交換層析和凝膠排阻色譜層析等分離純化工序獲得，所得多糖復(fù)合物為白色粉末，平均相對分子量為170kDa，由脂質(zhì)和多糖組成，其中脂質(zhì)含棕櫚酸和硬脂酸，多糖由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖組成。本發(fā)明的胞外多糖復(fù)合物組成明確，具備免疫調(diào)節(jié)作用，能顯著降低炎癥因子(ROS、iNOS、IL?6和TNF?α)水平，在臨床及相關(guān)醫(yī)療保健領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及功能性保健食品或生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的小球藻胞外多糖復(fù)合物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

微藻生物柴油已成為全世界公認(rèn)的第三代可持續(xù)生物燃料，其開發(fā)與應(yīng)用對解決目前化石燃料短缺和空氣污染問題具有重要意義。但微藻能源產(chǎn)業(yè)至今依舊面臨成本高昂的困境，尚處于起步階段，商業(yè)化應(yīng)用困難。提高藻細(xì)胞內(nèi)油脂積累率、增大油脂產(chǎn)量是降低微藻生物柴油成本的有效解決途徑之一。

國內(nèi)外圍繞藻細(xì)胞生長和油脂積累特性，通過改變溫度、光照、營養(yǎng)條件、鹽度、金屬離子等環(huán)境條件，在提高微藻細(xì)胞油脂產(chǎn)率的研究領(lǐng)域已取得較大成就，如采用指數(shù)末期-短時(shí)高溫應(yīng)激模式培養(yǎng)四尾柵藻(Scenedesmus quadricauda)能大大促進(jìn)藻細(xì)胞的油脂積累，使其脂質(zhì)含量和產(chǎn)率分別達(dá)到33.5％和23.2mg L^-1d^-1(Environ.Technol.,2016,37:2649-2657)；通過低磷環(huán)境可脅迫誘導(dǎo)小球藻(Chlorella sp.)油脂產(chǎn)率提升至15.67mg L^-1d^-1(J.Appl.Phycol.,2013,25:311-318.)；Faizal Bux等使用檸檬酸鐵銨脅迫的方法分別提升鐮形纖維藻(Ankistrodesmus falcatus)KJ671624的脂質(zhì)含量和脂質(zhì)生產(chǎn)率至59.6％和74.07mg L^-1d^-1(Biochem.,Eng.J.,2015,94,22-29)。盡管通過培養(yǎng)模式和培養(yǎng)條件的調(diào)控已較大幅度提高藻細(xì)胞產(chǎn)油效率，使其產(chǎn)量提升，但與石油價(jià)格相比，微藻生物柴油的價(jià)格依舊過于昂貴(Biofuels,2010,1:763-784)。實(shí)際上，微藻在生長過程中不僅會在細(xì)胞內(nèi)積累油脂，還會向細(xì)胞外環(huán)境中分泌多種代謝產(chǎn)物，如多糖、蛋白質(zhì)、脂類、色素、維生素、抑制和促進(jìn)因子等。這些次級代謝產(chǎn)物大多具有生物活性，有較大的開發(fā)和應(yīng)用前景，其中微藻多糖及其復(fù)合物不僅種類多樣，還具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、降血脂、降血糖等重要生物活性，在醫(yī)藥、臨床領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛能。開發(fā)利用微藻次級代謝產(chǎn)物、獲取高價(jià)值活性物質(zhì)是降低微藻柴油價(jià)格、加快微藻產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程的重要方式。

小球藻含有豐富的抗腫瘤活性、抗病原菌、抗病毒感染及增強(qiáng)免疫力的多糖及其復(fù)合物，但目前對原始小球藻(Chlorella protothecoides)多糖類物質(zhì)的研究較少，僅Mario等分析了其細(xì)胞壁多糖組成(Arch.Mikrobiol.,1973,92,227-233)，喬代蓉等優(yōu)化了其胞內(nèi)多糖的提取工藝(Chin.J.Appl.Environ.Biol.,2014,20(4):615-620)，至今未有原始小球藻胞外多糖及其復(fù)合物應(yīng)用價(jià)值的相關(guān)報(bào)道。本發(fā)明從原始小球藻(Chlorellaprotothecoides CS-41)發(fā)酵液中分離制備出一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的多糖復(fù)合物，不僅不會影響小球藻油脂的提取制備，還能高值化利用細(xì)胞外代謝產(chǎn)物獲取具有醫(yī)療保健前景的產(chǎn)品，對微藻資源的綜合開發(fā)、降低微藻油脂成本具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是獲取小球藻高值副產(chǎn)物，提供一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的小球藻胞外多糖復(fù)合物及其制備方法，同時(shí)還提供了該免疫調(diào)節(jié)多糖的生物活性用途。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：