[發明專利]一種解淀粉芽孢桿菌、應用及其發酵液的制備方法

在審

• 申請號: 201911122911.0
• 申請日: 2019-11-16
• 公開（公告）號: CN111218414A
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 朱三榮;劉天波;唐前君;段曉峰;田峰;周志成;巣進;滕凱;田明慧
• 申請（專利權）人: 湖南省煙草公司湘西自治州公司;中國煙草中南農業試驗站;湖南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/07
• 代理公司: 安化縣梅山專利事務所 43005
• 代理人: 夏贊希

本發明公開了一種解淀粉芽孢桿菌、應用及其發酵液的制備方法，所述解淀粉芽孢桿菌為抑制煙草花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的拮抗菌株，該解淀粉芽孢桿菌已在中國武漢武漢大學中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號為CCTCC NO：M2018795。通過本發明提供的所述解淀粉芽孢桿菌，能有效拮抑制煙草花葉病毒和馬鈴薯Y病毒，進而達到同時防治煙草花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的作用。

技術領域

本發明屬于生物防治技術領域，尤其涉及一種解淀粉芽孢桿菌、應用及其發酵液的制備方法。

背景技術

我國煙區遼闊，自然條件迥異，煙草本身可塑性強，容易受環境影響而變異，經過人們長期的栽培和選擇，形成了各具特色的眾多品種，加之不斷地從國外引進新品種，形成了類型俱全、數量豐富的煙草資源。蟲害和病害是影響煙草農藝性狀和經濟性狀的威脅因子，如煙草普通花葉病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)和馬鈴薯Y病毒(Potato virusY，PVY),是目前為止在煙草生產上分布最廣且發生普遍的兩大類病害。我國已發現的煙草病毒病有16種，其中TMV、CMV、PVY等3種病毒是引致煙草花葉病的主要病毒。它們能在植物細胞中寄生、復制，所需的物質、能量和場所也來源于寄主。煙草感染病毒后，葉綠素被破壞，光合作用減弱，葉片生長受抑制，防治較為困難，減產幅度為20％-80％，全球每年因這兩種病害造成的損失可達1億多美元。傳統的化學防治方法對抗煙草普通花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的效果不佳，并且連年使用化學藥劑，不僅使黑脛病病菌的抗藥性有所增強，而且對環境造成巨大污染。

因此，有必要提供一種生物防治煙草普通花葉病毒和馬鈴薯Y病毒病菌的方法。

申請內容

本發明所要解決的技術問題是，克服以上背景技術中提到的不足和缺陷，提供一種解淀粉芽孢桿菌、應用及其發酵液的制備方法，以解決現有煙草普通花葉病毒和馬鈴薯Y病毒采用化學藥劑防治，致使污染環境的技術問題。

為解決上述技術問題，本發明提出的技術方案為：一種解淀粉芽孢桿菌，所述解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)為抑制煙草花葉病毒和馬鈴薯Y病毒的拮抗菌株，所述解淀粉芽孢桿菌已在中國武漢武漢大學中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號為CCTCC NO：M2018795。

本發明還提供了一種如前述的解淀粉芽孢桿菌在防治煙草花葉病毒的應用。

本發明還提供了一種如前述的解淀粉芽孢桿菌在防治馬鈴薯Y病毒的應用。

本發明還提供了一種解淀粉芽孢桿菌發酵液的制備方法，所述制備方法包括：

步驟一，挑取如前述的解淀粉芽孢桿菌的單菌落于15～30ml LB液體培養基，在溫度為29～31℃，pH 6.5-7.5環境下下，150～220r/min振蕩培養，直至OD600在0.6～0.8，制備得到種子液；

步驟二，將所述步驟一中的種子液接種于裝有LB液體培養基的發酵罐中，所述種子液在LB液體培養基中的濃度為4～5％，在溫度為29～31℃，pH6.5-7.5環境下，150～220r/min恒溫培養48h～72h，制備得到所述解淀粉芽孢桿菌發酵液。

優選地，所述LB液體培養基包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉，所述胰蛋白胨的濃度為9～11g/L，所述酵母提取物的濃度為4～6g/L，所述氯化鈉的濃度為0.8～1.2g/L。

與現有技術相比，本發明提供的所述解淀粉芽孢桿菌能同時抑制煙草普通花葉病毒和馬鈴薯Y病毒，從而為防治煙草普通花葉病毒和馬鈴薯Y病毒提供了新的選擇；由于本發明提供解淀粉芽孢桿菌發酵液為生物制劑，對環境無化學污染。

附圖說明