[發明專利]一種同時檢測青霉和鐮刀菌的微滴數字PCR檢測方法在審
| 申請號： | 201911098128.5 | 申請日： | 2019-11-12 |
| 公開（公告）號： | CN112852988A | 公開（公告）日： | 2021-05-28 |
| 發明（設計）人： | 陳穎;趙曉美;王娉;張慶 | 申請（專利權）人： | 中國檢驗檢疫科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11;C12R1/77;C12R1/80 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100176 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 同時 檢測 青霉 鐮刀 數字 pcr 方法 | ||
1.用于雙重微滴數字PCR方法檢測青霉和鐮刀菌的核酸引物對及探針
其中所述引物對選自以下引物對：
Pen-F：CGACAATACCACTCGAA；
Pen-R：ACTGACCGAAGACGAAGTTGT；
ITS -F：GGATACTTTTGATGCGGTGCCT；
ITS -R：TACTTGTGCGCTATCGGTC；
探針序列為：
Pen-P：CY5-ATGTAAGTTGCGTGTCCAGTCAA-BHQ3；
ITS -P：FAM-TGCTGCTCTAAATGGGAGG-BHQ1。
2.根據權利要求1所述的寡核苷酸引物對及探針，其中所述數字PCR方法為微滴數字PCR法。
3.權利要求1所述的引物對和探針，其中，在探針的3’末端連接有熒光淬滅基團，5’末端連接有熒光報告基團。
4.權利要求3所述的引物對和探針，其中，所述熒光淬滅基團為BHQ、BHQ1、BHQ2或TAMRA，所述熒光報告基團為FAM、HEX或VIC。
5.用于通過雙重微滴數字PCR方法檢測青霉和鐮刀菌的試劑盒，其中所述試劑盒包括權利要求1-4任一項所述的引物對和探針。
6.通過雙重微滴數字PCR方法檢測青霉和鐮刀菌的方法，所述方法包括使用權利要求1-4任一項所述的引物對和探針或者權利要求5中所述的試劑盒，所述方法不用于疾病診斷和治療目的。
7.權利要求6所述的方法，包括：
(a) 提供雙重微滴數字PCR反應的條件；
(b) 使用權利要求1-4任一項所述的引物對和探針或權利要求5中所述的試劑盒，通過雙重微滴數字PCR方法進行核酸擴增反應和檢測擴增產物。
8.權利要求1-4任一項所述的引物和探針或者權利要求5中所述的試劑盒在檢測青霉和鐮刀菌的應用，所述應用不用于疾病診斷和治療目的。
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