[發明專利]微生物發酵生產乙醇中代謝物的高效液相檢測方法

在審

• 申請號: 201911079194.8
• 申請日: 2019-11-07
• 公開（公告）號: CN111089914A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 張春悅;范義文;鄭孟北;王永祥;姚連孟;曹亞楠;趙壹浩;宗福寶
• 申請（專利權）人: 河北首朗新能源科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34
• 代理公司: 北京華沛德權律師事務所 11302
• 代理人: 馬苗苗

本發明提供一種含CO氣體微生物發酵生產燃料乙醇中代謝物的高效液相檢測方法，通過高效液相色譜分析，測定含CO氣體微生物發酵生產燃料乙醇的發酵液中代謝物的含量，所述代謝物包括乙醇、乙酸、乳酸和2，3?丁二醇，其特征在于，所述色譜條件為：色譜柱：Alltech IOA?2000 Organic Acid色譜柱；流動相：濃度5mmol/L的硫酸溶液；流速：0.7mL/min；柱溫：55℃；檢測器：RID檢測器。

技術領域

本發明涉及工業發酵領域，具體涉及含CO氣體微生物發酵生產燃料乙醇中代謝物的高效液相檢測方法。

背景技術

含CO氣體微生物發酵生產乙醇過程中，發酵液中的乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇等發酵代謝物的含量對整個工藝控制有著極其重要的作用，含量過高或過低均會對最終產品的品質或菌體健康產生不良影響，目前，對于CO氣體微生物發酵生產乙醇中代謝物的檢測，存在操作繁瑣、難度大、準確率低的問題，因此，本領域亟需一種可以同時快速準確檢測微生物發酵生產乙醇中產生的乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇含量的方法，以滿足生產過程中質量控制的需要。

發明內容

鑒于上述問題，提出了本發明以便提供一種克服上述問題或者至少部分地解決上述問題的檢測微生物發酵生產乙醇中代謝物的方法。

本發明實施例提供一種含CO氣體微生物發酵生產燃料乙醇中代謝物的高效液相檢測方法，通過高效液相色譜分析，測定微生物發酵生產乙醇的發酵液中代謝物的含量，所述代謝物包括乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇，其特征在于，所述色譜條件為：

色譜柱：Alltech IOA-2000Organic Acid色譜柱；

流動相：硫酸濃度4-6mmol/L，溶劑為超純水；

流速：0.5-1mL/min；

柱溫：50-60℃；

檢測器：RID；

運行時間：9-11min。

進一步地，所述色譜條件為：

色譜柱：Alltech IOA-2000Organic Acid色譜柱；

流動相：硫酸濃度5mmol/L，溶劑為超純水；

流速：0.7mL/min；

柱溫：55℃；

檢測器：RID；

運行時間：10min。

進一步地，所述高效液相色譜分析中，進樣體積為9-11μL。

進一步地，所述方法包括如下步驟：

S1:配制標準溶液，所述標準溶液為乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇的混合溶液；

S2:采用高效液相色譜儀，分別對各標準溶液進行液相色譜分析，記錄分析得到的峰面積，并采用外標法分別繪制乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇的含量-峰面積的標準曲線回歸方程；

S3:采用與標準溶液完全相同的檢測儀器和色譜條件，對待測含有乙醇、乙酸、乳酸和 2,3-丁二醇的溶液進行液相色譜分析，記錄峰面積，根據步驟S2中的標準曲線回歸方程計算得出所述含有乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇的溶液中乙醇、乙酸、乳酸和2,3-丁二醇的含量。