[發明專利]制備生物表面活性劑的方法

有效

• 申請號: 201911077110.7
• 申請日: 2019-11-06
• 公開（公告）號: CN110724713B
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發明（設計）人: 孫璟;吳雋松
• 申請（專利權）人: 江蘇醫藥職業學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/04;C12M1/00;C12M1/26;C12M1/12;C12M1/04;B01D61/18;B01D61/14;B01D61/58;B01D61/00;C12R1/385
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

1.一種制備生物表面活性劑的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)對銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)CGMCC No1.10452進行活化培養，得到種子液；

(2)將所述種子液接種于發酵培養基，進行發酵培養，獲得發酵液，從所述發酵液中提取所述生物表面活性劑；

其中所述發酵培養基包括以下濃度的組分：

20～50g/L的甘油；

3～10g/L的酵母膏；

5～10g/L的磷酸二氫鹽；

1～5g/L的磷酸一氫鹽；

0.04～0.1g/L的CaCl₂；

0.02～0.1g/L的FeSO₄；以及

0.10～0.5g/L的MgSO₄·7H₂O。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發酵培養在發酵罐中進行，所述發酵罐的通氣量為1.5～2.5L/min，發酵溫度為30～37℃。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述發酵罐的裝液量為所述發酵罐容積的40％～80％。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述從所述發酵液中提取所述生物表面活性劑的步驟包括以下步驟：

利用第一膜分離組件(M1)對所述發酵液進行抽濾，去除所述發酵液中的所述銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)，獲得無菌發酵液；

利用第二膜分離組件(M2)對所述無菌發酵液進行抽濾，分離所述無菌發酵液中的水相與油相，獲得含有所述生物表面活性劑的油相。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)在發酵系統中進行，所述發酵系統包括：發酵罐(C1)、第一接收池(C2)、第二接收池(C3)、所述第一膜分離組件(M1)、所述第二膜分離組件(M2)、第一真空抽濾泵(P1)、第二真空抽濾泵(P2)、取樣管路(X1)、以及分離管路(X2)；

所述發酵罐(C1)與所述第一接收池(C2)通過所述取樣管路(X1)連通；

所述第一真空抽濾泵(P1)設置在所述取樣管路(X1)上；

所述第一接收池(C2)與所述第二接收池(C3)通過所述分離管路(X2)連通；

所述第二真空抽濾泵(P2)設置在所述分離管路(X2)上；

所述第一膜分離組件(M1)位于所述發酵罐(C1)的內部，并且與所述取樣管路(X1)的進液端連通；

所述第二膜分離組件(M2)位于所述第一接收池(C2)的內部，并且與所述分離管路(X2)的進液端連通；

所述步驟(2)包括以下步驟：

將所述種子液接種于所述發酵罐(C1)內的發酵培養基，進行發酵培養，獲得發酵液；

開啟所述第一真空抽濾泵(P1)，通過所述第一膜分離組件(M1)對所述發酵液進行過濾，所述發酵液中的所述銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)滯留在所述發酵罐(C1)內，其余部分經過所述第一膜分離組件(M1)和所述取樣管路(X1)導入到所述第一接收池(C2)內，獲得所述無菌發酵液；

開啟所述第二真空抽濾泵(P2)，通過所述第二膜分離組件(M2)對所述無菌發酵液進行過濾，所述無菌發酵液中的水相滯留在所述第一接收池(C2)內，油相經過所述第二膜分離組件(M2)和所述分離管路(X2)導入到所述第二接收池(C3)，從而獲得所述含有所述生物表面活性劑的油相。

6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述第一膜分離組件(M1)中的濾膜為親水性膜；

所述第二膜分離組件(M2)中的濾膜為疏水性膜。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述親水性膜選自纖維素膜、聚醚砜膜和尼龍膜中的至少一種；

所述疏水性膜選自陶瓷超濾膜、聚丙烯膜和聚四氟乙烯膜中的至少一種。