[發(fā)明專(zhuān)利]一種兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的建立方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911068255.0
• 申請(qǐng)日: 2019-11-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110637788B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孔令澤;唐梅;李慧;賀永勝
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 云南洛宇生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01K67/02
• 分類(lèi)號(hào): A01K67/02
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• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了一種兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的建立方法，所述方法包括以下步驟：采集家兔耳緣靜脈血清，檢測(cè)血清中甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量；第一次對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液，混合溶液為肥大細(xì)胞和血小板各1ml混勻，2天后，第二次對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液，2天后，第三次對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液；肥大細(xì)胞和血小板混合溶液注射4周后采集耳緣靜脈血清。本發(fā)明通過(guò)對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液，使得兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的成模率高、成模周期短，實(shí)驗(yàn)成本大大降低。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ图夹g(shù)領(lǐng)域，具體為一種兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的建立方法。

背景技術(shù)

隨著人們生活水平的提高以及生活飲食與作息的不規(guī)律，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化日益在臨床上高發(fā)，包括冠狀動(dòng)脈粥樣硬化，腦動(dòng)脈硬化，腸系膜動(dòng)脈粥樣硬化等，由于其致病原因多而復(fù)雜，關(guān)于其發(fā)病的基礎(chǔ)性研究也越來(lái)越得到重視，研究動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型，是對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的臨床發(fā)現(xiàn)與治療的基礎(chǔ)性研究，除田鼠和地鼠外，一般溫血?jiǎng)游镏灰椒ㄟm當(dāng)都能形成動(dòng)脈粥樣硬化的斑塊病變，常選用兔、豬、大鼠、雞、鴿、猴和犬等動(dòng)物，常用的復(fù)制方法有高膽固醇、高脂肪飼料喂養(yǎng)法，免疫學(xué)方法，兒茶酚胺類(lèi)藥物注射法，同型半胱氨酸注射法，幼乳大白鼠法及膽固醇－脂肪乳劑靜脈注射法等，現(xiàn)有的兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型是用高膽固醇飼料喂養(yǎng)法與免疫反應(yīng)損傷法結(jié)合建立兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型，分別于高脂飼養(yǎng)前、第二周、第四周、第六周、第八周測(cè)定血甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)和極低密度脂蛋白(VLDL)的含量，并在每次高脂飼料喂養(yǎng)后后作形態(tài)學(xué)觀察，并在第八周后通過(guò)外科手術(shù)取出兔頸動(dòng)脈，制作病理切片病理切片，檢測(cè)斑塊成膜情況，分析其斑塊性質(zhì)，確定建立起動(dòng)脈粥樣硬化的模型，但是現(xiàn)有的高脂飼料喂養(yǎng)建立兔動(dòng)脈粥樣硬化模型存在以下不足：成模率低甚至無(wú)法成模；實(shí)驗(yàn)周期過(guò)長(zhǎng)；高脂飼料成本較高造成動(dòng)物飼養(yǎng)成本較高，因此有必要對(duì)現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)，以解決上述問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

(一)解決的技術(shù)問(wèn)題

本發(fā)明的目的在于提供一種兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的建立方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的現(xiàn)有的高脂飼料喂養(yǎng)建立兔動(dòng)脈粥樣硬化模型存在以下不足：成模率低甚至無(wú)法成模；實(shí)驗(yàn)周期過(guò)長(zhǎng)；高脂飼料成本較高造成動(dòng)物飼養(yǎng)成本較高的問(wèn)題。

(二)技術(shù)方案

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種兔動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的建立方法，所述方法包括以下步驟：

S1：采集家兔耳緣靜脈血清，檢測(cè)血清中甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量；

S2：第一次對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液，混合溶液為肥大細(xì)胞和血小板各1ml混勻，肥大細(xì)胞的密度為1.5×10⁷個(gè)/ml，血小板的密度為6×10⁸個(gè)/ml，2天后，第二次對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液，2天后，第三次對(duì)家兔耳緣靜脈注射肥大細(xì)胞和血小板混合溶液；

S3：肥大細(xì)胞和血小板混合溶液注射4周后采集耳緣靜脈血清，檢測(cè)血清中甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量，通過(guò)對(duì)比肥大細(xì)胞和血小板混合溶液注射前后指標(biāo)，來(lái)判斷成模情況；

S4：對(duì)肥大細(xì)胞和血小板混合溶液注射4周后的家兔進(jìn)行動(dòng)脈血管超聲檢測(cè)，判斷成模情況；

S5：對(duì)肥大細(xì)胞和血小板混合溶液注射4周后的家兔手術(shù)取出腹主動(dòng)脈以及頸總動(dòng)脈，制作病理切片檢測(cè)成模情況，該動(dòng)物模型的建立過(guò)程中家兔采用普通飼料飼養(yǎng)。