[發明專利]piRNA-26131在制備甲狀腺癌診斷和預后標記物中的應用

有效

• 申請號: 201911054695.0
• 申請日: 2019-10-31
• 公開（公告）號: CN110819712B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 蔚青;常爭艷;黃莉莉;高耀輝
• 申請（專利權）人: 上海市第十人民醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 高振紅

本發明一方面提供piRNA?26131在制備甲狀腺癌診斷和預后標記物中的應用。本發明的第二方面提供piRNA?26131在制備診斷甲狀腺癌或判斷甲狀腺癌是否復發的試劑盒中的應用。此外，本發明還提供一種檢測用于非診斷和治療目的的檢測甲狀腺癌組織或血液中piRNA?26131的方法。過表達或敲減piRNA?26131后，甲狀腺癌細胞的增殖及侵襲轉移能力明顯增強或減弱，piRNA?26131高表達患者復發概率高，所以piRNA?26131可以作為血液篩選分子標志物用于甲狀腺癌患者的早期篩查和腫瘤復發指標，具有重要意義和應用前景。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及piRNA-26131在制備甲狀腺癌診斷和預后標記物中的應用。

背景技術

甲狀腺癌是最常見的內分泌系統惡性腫瘤之一，約占全身惡性腫瘤的2％，且多發于40歲左右的青壯年，據統計顯示甲狀腺癌的發病率呈逐年增高趨勢。目前臨床對于甲狀腺癌的早期診斷仍采用體檢和影像學等有限的檢查方法，具有一定的局限性，而且缺少預警價值。常用的診斷標志物容易與甲狀腺炎、甲狀腺結節相混淆，因而易造成誤診。隨著分子生物學技術的不斷進步，為了滿足臨床診斷提高靈敏度和特異性的要求，開發新的血液腫瘤標志物勢在必行。

PIWI-interacting RNA(簡稱piRNA)為最新發現的一類小分子RNA，長度為 26～31nt單鏈非編碼RNA，在基因表達調控和轉座子抑制方面起重要功能作用。盡管早期研究表明piRNA在生殖系統發育中扮演者重要角色，但越來越多的研究報道發現piRNA與腫瘤發生密切相關。目前已有研究證實piRNA在子宮內膜癌、胰腺癌、胃癌、肝癌及乳腺癌等各類腫瘤中表達異常，且擾動這些腫瘤細胞中特定的piRNA能影響增殖、轉移、侵襲等細胞惡性表型。另外，piRNA在維持基因組穩定，保障細胞細胞正常功能中起到重要作用。眾所周知，哺乳動物中存在著轉座子(Transposons)序列的DNA或mRNA，可將一段DNA序列嵌入至另一段DNA中。研究發現轉子序列占基因組的近40％，一旦這種“jumping genes”發生混亂，將導致基因組毀滅性的災難，導致腫瘤的發生。但是，目前缺少甲狀腺癌與相關piRNA的報道。

發明內容

為了克服現有技術中的缺陷，本發明提供piRNA-26131在制備甲狀腺癌診斷和預后標記物中的應用，piRNA-26131具有極好的組織特異性和相關性，并且擴大樣本通過RT-PCR方法實時定量檢測，為甲狀腺癌的早期診斷和復發提供了新的分子標志物。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

本發明的第一方面是piRNA-26131在制備甲狀腺癌診斷和預后標記物中的應用。

進一步地，piRNA-26131的基因序列為：

TTTGGCAATGGTAGAACTCACACTGGTGAGGT。

本發明的第二方面是提供piRNA-26131在制備診斷甲狀腺癌或判斷甲狀腺癌是否復發的標記物中的應用。

本發明的第三方面是提供piRNA-26131在制備診斷甲狀腺癌或判斷甲狀腺癌是否復發的試劑盒中的應用，所述試劑盒包括用于檢測受試者組織中 piRNA-26131的表達水平的試劑。

進一步地，所述試劑盒包括用于檢測受試者血液中piRNA-26131的表達水平的試劑。

本發明的第四方面是提供一種用于非診斷和治療目的的檢測甲狀腺癌組織或血液中piRNA-26131的方法，包括如下步驟：

(1)血液及組織樣本收集及處理；

(2)RNA抽提；

(3)RNA的定量和逆轉錄：使用分光光度計測定RNA的濃度后，配制逆轉錄反應液，設定程序參數；