[發明專利]一種血塞通注射劑物質基礎數據庫的建立方法

在審

• 申請號: 201911035327.1
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN112750509A
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 朱常成;劉暘;楊兆祥;李修齊;李寧
• 申請（專利權）人: 昆藥集團股份有限公司
• 主分類號: G16C20/62
• 分類號: G16C20/62
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

本發明涉及UPLC?Orbitrap HRMS技術領域，特別涉及一種血塞通注射劑物質基礎數據庫的建立方法。該方法為：取供試品和對照品，利用UPLC?Orbitrap HRMS進行分離和鑒定；供試品中未知化合物根據高分辨質譜數據預測分子組成，并進行化合物推斷；利用Database Manager建立數據庫。本發明對血塞通注射劑的物質基礎進行系統性研究，為血塞通的進一步開發利用提供基礎性研究資料，并對其系統研究皂苷類成分的藥效物質基礎并明確與功能主治的相關性，對血塞通中有效成分的二次開發具有指導意義。

技術領域

本發明涉及UPLC-Orbitrap HRMS技術領域，特別涉及一種血塞通注射劑物質基礎數據庫的建立方法。

背景技術

中藥化學成分復雜，如何快速、全面地鑒定中藥化學成分、闡明中藥藥效物質基礎以及建立穩定全面的質量控制方法是中藥現代研究和國際化面臨的重要難題。目前，中藥的物質基礎與質量控制研究尚不能全面反映中藥復雜物質體系的內涵與特征性，缺乏高效、精確鑒定化學物結構的方法是一個重要原因。傳統的中藥化學成分研究方法為：通過利用反復柱層析等手段從原料中提取、純化單體物質，再利用UV、IR、¹H-NMR、¹³C-NMR、MS等方法進行結構鑒定。這不僅需要花費大量的人力、物力和財力，而且中藥中含量低的成分也大多損失殆盡，無法獲取藥材全面的信息特征。

血塞通注射液是以三七總皂苷為原料精制而成的中藥注射劑。近年來有關血塞通注射劑的不良反應時有報道，其臨床安全性引起社會關注。究其原因，血塞通注射劑的化學成分復雜、藥效物質不甚明確可能是影響血塞通注射液臨床安全性的主要因素。至今為止，關于血塞通注射劑發揮藥效作用的化學成分以及作用機制的研究報道較少。

因此，對血塞通注射液中的皂苷類藥效物質化學結構及其藥理作用進行了系統研究，對保證血塞通注射液的質量穩定、用藥安全以及血塞通注射液中有效成分的二次開發均具有十分重要的意義。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種血塞通注射劑物質基礎數據庫的建立方法。該方法對血塞通注射劑的物質基礎進行系統性研究，為血塞通的進一步開發利用提供基礎性研究資料，并對其系統研究皂苷類成分的藥效物質基礎并明確與功能主治的相關性，對血塞通中有效成分的二次開發具有指導意義。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種血塞通注射劑物質基礎數據庫的建立方法，包括如下步驟：

分別取供試品溶液和對照品溶液，利用UPLC-Orbitrap HRMS進行分離和鑒定，UPLC-Orbitrap HRMS的色譜條件和質譜條件如下：

色譜條件：Brige Shield RP18色譜柱；流動相A為0.08vt％～0.12vt％甲酸水溶液，流動相B為乙腈；梯度洗脫程序為：0min，18％B；10min，18％B；28min，26％B；51min，30％B；67min，39％B；85min，64％B；

質譜條件：

工作模式：ESI^-，FullMS/dd-MS²(TopN)模式，掃描范圍m/z 150～2000，分辨率60000～80000；

離子源參數：鞘氣流速60～70arb，輔助氣流速15～25arb，吹掃氣流速3～5arb，噴霧電壓2.0～3.0kV，毛細管溫度280～320℃，S-lens電壓45～55V，加熱溫度450～550℃；

根據CID裂解所產生的中性丟失碎片，判斷對照品所連接糖基種類與數量，同時推斷端基位糖基類別；

供試品中未知化合物根據高分辨質譜數據預測分子組成，并根據其多級質譜碎片信息推斷化合物所連接糖基個數與種類，與已知化合物的分子質量、化學結構、保留時間和質譜裂解行為比對，進行化合物推斷；