[發(fā)明專利]檢測(cè)樣本中MLL5基因相對(duì)表達(dá)量的寡核苷酸、方法和試劑盒

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201911025523.0
• 申請(qǐng)日: 2019-10-25
• 公開（公告）號(hào): CN110699454A
• 公開（公告）日: 2020-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉趙玲;李允章;王淑一
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 33100 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 黃素萍

1.用于檢測(cè)樣本中MLL5基因相對(duì)表達(dá)量的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸包括檢測(cè)用上游引物MLL5-F、檢測(cè)用上游引物MLL5-R和檢測(cè)用探針MLL5-Probe，其堿基序列如下所示：

MLL5-F：CCTTTACCAACACCAGCTACAG

MLL5-R：GTTCCACTGAAGTTGAGGCAGT

MLL5-Probe：FAM-TGAACCAGAAGTTCAATGGACTGCCTC-TAMRA。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸還包括針對(duì)內(nèi)參基因ABL的上游引物ABL-F、下游引物ABL-R和探針ABL-Probe，其堿基序列如下所示：

ABL-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA

ABL-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA

ABL-Probe：FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。

3.一種檢測(cè)樣本中MLL5基因相對(duì)表達(dá)量的方法，所述方法包括以下步驟：(1)提取樣本中的RNA；(2)將步驟(1)中的RNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA；(3)利用熒光PCR擴(kuò)增步驟(2)所述的cDNA，并計(jì)算MLL5基因相對(duì)表達(dá)量，其特征在于，步驟(3)中的熒光PCR擴(kuò)增是在檢測(cè)用上游引物MLL5-F、檢測(cè)用上游引物MLL5-R、檢測(cè)用探針MLL5-Probe以及針對(duì)內(nèi)參基因ABL的上游引物ABL-F、下游引物ABL-R和探針ABL-Probe的存在下進(jìn)行的，其堿基序列如下所述：

MLL5-F：CCTTTACCAACACCAGCTACAG

MLL5-R：GTTCCACTGAAGTTGAGGCAGT

MLL5-Probe：FAM-TGAACCAGAAGTTCAATGGACTGCCTC-TAMRA；

ABL-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA

ABL-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA

ABL-Probe：FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。

4.一種檢測(cè)樣本中MLL5基因相對(duì)表達(dá)量的試劑盒，所述試劑盒包括檢測(cè)體系PCR反應(yīng)液，其特征在于，所述檢測(cè)體系PCR反應(yīng)液包括檢測(cè)用上游引物MLL5-F、檢測(cè)用上游引物MLL5-R和檢測(cè)用探針MLL5-Probe，其堿基序列如下所示：

MLL5-F：CCTTTACCAACACCAGCTACAG

MLL5-R：GTTCCACTGAAGTTGAGGCAGT

MLL5-Probe：FAM-TGAACCAGAAGTTCAATGGACTGCCTC-TAMRA。

5.如權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征還在于，所述檢測(cè)體系PCR反應(yīng)液還包括針對(duì)內(nèi)參基因ABL的上游引物ABL-F、下游引物ABL-R和探針ABL-Probe，其堿基序列如下所示：

ABL-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA

ABL-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA

ABL-Probe：FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。

6.如權(quán)利要求4～5之一所述的試劑盒，所述試劑盒還包括陽性對(duì)照品、陰性對(duì)照品和空白對(duì)照品，其特征在于，所述陽性對(duì)照品為含有MLL5 cDNA序列的陽性質(zhì)粒溶液，所述陰性對(duì)照品為不含有MLL5 cDNA序列的質(zhì)粒溶液，所述空白對(duì)照品為生理鹽水或不加任何物質(zhì)。