[發明專利]一種獸用水溶性殼聚糖脂質體佐劑的制備方法在審
| 申請號: | 201911007903.1 | 申請日: | 2019-10-22 |
| 公開(公告)號: | CN110613843A | 公開(公告)日: | 2019-12-27 |
| 發明(設計)人: | 王春維;王雪輝;祝愛俠;夏廉臣;陶冶;萬蒙;陳懿琳 | 申請(專利權)人: | 武漢輕工大學 |
| 主分類號: | A61K39/39 | 分類號: | A61K39/39;A61P37/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 430023 湖北省武*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 水溶性殼聚糖 脂質體佐劑 獸用 佐劑 制備 殼聚糖鹽酸鹽 有機溶劑殘留 蜂膠 高水平抗體 細胞相容性 貯存穩定性 磷脂 熱穩定性 均一性 戊二醛 膽固醇 分層 粒徑 體內 | ||
1.一種獸用水溶性殼聚糖脂質體佐劑的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)將磷脂和膽固醇均溶解在三氯甲烷中混合后得到混合溶液A;
(2)按照蜂膠:95%的乙醇=1kg:(15-25)L的比例,將蜂膠溶于95%的乙醇中配制成蜂膠乙醇溶液;
(3)步驟(1)中得到的混合溶液A與步驟(2)中得到的蜂膠乙醇溶液按照體積比1:(1-3)進行均勻混合,得到混合溶液B;
(4)將步驟(3)中得到的混合溶液B轉移至旋轉蒸發儀中,進行真空旋轉蒸發除去有機溶劑,旋轉蒸發儀燒瓶內壁形成脂質膜;
(5)用去離子水洗下步驟(4)中旋轉蒸發儀燒瓶內壁的脂質膜,混勻溶液后得到混合溶液C;
(6)使步驟(5)中得到的混合溶液C在40-60℃溫度下、在功率150-250W的超聲處理下、在壓力為12-16Mpa的二氧化碳氣氛下孵化0.5-1.5h,得到蜂膠脂質體溶液;
(7)將殼聚糖鹽酸鹽用去離子水溶解后制得殼聚糖鹽酸鹽溶液,殼聚糖鹽酸鹽溶液與步驟(6)中制得的蜂膠脂質體溶液按照等體積比例進行均勻混合,在(500-700)r/min的條件下結合0.5-1.5h;
(8)微球制備處理;以重量份計,取步驟(7)中處理得到的溶液5-15份加入50-100份液體石蠟(含3%(質量分數)Span 80)中,40-60℃恒溫水浴條件下800-1500r/min攪拌20-60min,形成白色W/O乳液,逐滴加入戊二醛水溶液交聯,繼續攪拌2-5h;石油醚、異丙醇充分洗滌沉淀后離心分離,真空干燥,即得;
所述磷脂:膽固醇:三氯甲烷:殼聚糖鹽酸鹽的重量份比例為:(75-100):(25-100):(10-15):(15-20)。
2.如權利要求1所述的一種獸用水溶性殼聚糖脂質體佐劑的制備方法,其特征在于,所述磷脂為卵磷脂或豆磷脂或卵磷脂與豆磷脂任意比例的混合物。
3.如權利要求2所述的一種獸用水溶性殼聚糖脂質體佐劑的制備方法,其特征在于,所述卵磷脂為蛋黃卵磷脂。
4.如權利要求1所述的一種獸用水溶性殼聚糖脂質體佐劑的制備方法,其特征在于,步驟(4)中真空旋轉蒸發處理的旋蒸溫度為35-40℃,轉速為80-150r/min。
5.如權利要求1所述的一種獸用水溶性殼聚糖脂質體佐劑的制備方法,其特征在于,步驟(3)中混合溶液A與蜂膠乙醇溶液在超聲作用下進行均勻混合。
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