[發明專利]一株具有正己烯降解能力的惡臭假單胞菌及其應用

有效

• 申請號: 201510020121.7
• 申請日: 2015-01-15
• 公開（公告）號: CN104531592A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 於建明;成卓韋;陳建孟;蔡文吉
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;B01D53/84;B01D53/72;B01D53/70;C12R1/40;C02F101/32;C02F101/36
• 代理公司: 杭州天欣專利事務所(普通合伙) 33209
• 代理人: 陳琳

技術領域

本發明涉及一株惡臭假單胞菌（Pseudomonas?putida）WJ，及其在微生物降解正己烯、苯乙烯中的應用。

背景技術

正己烯（C₆H₁₂，1-Hexane）是一種廣泛使用的非水溶性有機溶劑，主要用于制造香料、染料及合成樹脂，具有一定的毒性，會通過呼吸道、皮膚等途徑進入人體，長期接觸可導致人體出現頭痛、頭暈、乏力、四肢麻木等慢性中毒癥狀，嚴重的可導致暈倒、神志喪失、甚至死亡。?該物質對環境具有危害，能引起地表水、土壤、大氣和飲用水的污染，因此研究正己烯的凈化技術就顯得十分迫切和重要。

生物凈化技術具有去除效率高、處理費用低、二次污染小等特點，逐漸被廣泛應用于有毒污染物的降解和凈化。專利號為201010204536.7，專利名稱為“高活性高耐受甲醛降解菌及其應用”的中國專利中公開了惡臭假單胞菌在降解甲醛方面的應用。專利號為：201210573242.0，專利名稱為“苯系物復合降解菌和固定化苯系物復合菌劑及其制備方法”的中國專利中公開了惡臭假單胞菌在降解苯系物方面的應用。現有技術中還未獲得具有高效降解正己烯能力的菌株，也未發現惡臭假單胞菌在降解正己烯方面的應用。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術中的不足而提供一種高效降解、耐受能力強的具有正己烯降解能力的惡臭假單胞菌及其應用。

本發明解決上述技術問題采用的技術方案是：該具有正己烯降解能力的惡臭假單胞菌（Pseudomonasputida）WJ，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO：M?2012295，保藏日期：2012年7月19日。本發明的惡臭假單胞菌WJ取自廢水處理單元，對于正己烯化合物，具有較好地降解效果，能較為完全地把低毒性的正己烯有機物轉化為CO₂、H₂O、細胞生物量等無害物質。

本發明所述的菌落透明，表面光滑，邊緣整齊；透射電鏡下觀察該菌體的形態為多鞭毛、橢球狀，大小為（0.7~1.1）μm×（2.0~2.4）μm，革蘭氏染色陰性，氧化酶陽性，淀粉水解陰性，無法利用果糖。

本發明還涉及該具有正己烯降解能力的惡臭假單胞菌WJ在微生物降解正己烯、苯乙烯中的應用。將惡臭假單胞菌WJ經培養獲得的菌懸液，投入到分別含25、100、300、800、1500、2000?mg·L^-1濃度正己烯模擬廢水，在溫度30℃，pH?7.0，160?rpm搖床條件下培養，定時測定培養液中殘留的正己烯和生物量。該菌株能降解初始濃度0~1500?mg/L的正己烯，最終降解產物為CO₂、H₂O和細胞生物量。該降解菌的發現對工業廢水廢氣中正己烯的高效凈化具有重要意義。此外，惡臭假單胞菌WJ還能不同程度的降解苯乙烯、氯苯、二氯甲烷。

本發明所述降解在30℃、pH?7.0，160rpm搖床中連續培養條件下進行。上述條件的有益之處是能在較短的時間內獲得大量有高降解活性的菌體。

本發明與現有技術相比具有以下優點：本發明篩選獲得一株具有正己烯高效降解能力的降解菌，還具有降解其他多種有機污染的能力，具有良好的工程應用價值。該菌株能在50h內將1500mg/L含正己烯的廢水降解完全，未表現出任何生長受抑制現象。該菌株在其他污染物共存的情形下生長和降解性能均未受到抑制，表明該菌株適應環境較寬泛。

附圖說明

圖1為Pseudomonas?putida?WJ的透射電鏡照片。

圖2?為Pseudomonas?putida?WJ的系統發育樹圖。

圖3為Pseudomonas?putida?WJ?Biolog鑒定結果。

圖4為菌株WJ的部分生理生化試驗結果。

圖5a為Pseudomonas?putida?WJ在不同溫度下對正己烯降解效率及生長速率的影響。

圖5b為Pseudomonas?putida?WJ在不同pH值下對正己烯降解效率及生長速率的影響。

圖6為Pseudomonas?putida?WJ對不同濃度正己烯的降解曲線。

圖7為Pseudomonas?putida?WJ對工業常見有機污染物降解性能。

具體實施方式