[發明專利]一種女貞子生品和酒制品的鑒別方法

有效

• 申請號: 201910972915.1
• 申請日: 2019-10-14
• 公開（公告）號: CN110596277B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 劉二偉;高秀梅;楊文志;韓立峰;李夢榮
• 申請（專利權）人: 天津中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/04;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京柏杉松知識產權代理事務所(普通合伙) 11413
• 代理人: 張函;劉繼富

本發明涉及一種女貞子生品和酒制品的鑒別方法。所述鑒別方法以10?羥基?木樨欖苷二甲酯、新女貞苷或異構體、8?demethyl?7?ketologanin、elenolic acid、毛蕊花糖苷、木樨草素中的一種或至少兩種作為標志物；以橄欖苦苷糖苷配基為內標；以超高效液相色譜/四極桿?軌道阱質譜對待測樣品進行檢測。本發明首先選取了標志物及內標，可有效將女貞子的生品和酒制品進行區分。進一步提供了采用超高效液相色譜/四極桿?軌道阱質譜(UHPLC/Q?Orbitrap?MS)對樣品進行分離和檢測，可有效分離女貞子樣品并進行檢測，即可準確判斷樣品是否為生品或酒制品。

技術領域

本發明涉及藥材檢測技術領域，特別是涉及一種女貞子生品和酒制品的鑒別方法。

背景技術

女貞子(Ligustri Lucidi Fructus)為木犀科植物女貞的干燥成熟果實，具有滋補肝腎明目烏發的功效，2002年衛生部公布女貞子可用于保健食品。從女貞子中已分離出多類生物活性天然成分(包括三萜，環烯醚萜，類黃酮，報道了苯乙醇苷等)，藥理作用包括抗腫瘤，保肝，免疫調節，抗氧化，抗衰老，抗炎和降低高膽固醇血癥等。在臨床實踐中，2015版藥典中記錄了女貞子的多種炮制方法，以加強藥物效用，減除毒性或副作用，其中以酒制品使用最為重要。

另外，藥典中收藏30個包含女貞子的復方，其中為酒女貞子的有9種。但目前關于炮制后的女貞子成分變化的研究關注的多為極少數(通常少于5個)或單一類型的化合物(如三萜類齊墩果酸和熊果酸；環烯醚萜類特女貞苷，橄欖苦苷，G13，女貞苷，木樨欖苷-11-甲酯和女貞酸；以及苯乙醇類的紅景天苷，羥基酪醇，酪醇，松果菊苷等)，缺乏潛在化學基礎全面系統的研究。女貞子表面為黑紫色或灰黑色，皺縮不平，酒制品由于在炮制過程中，其內含物隨酒滲出附于表面而具有一層白色霜狀物。

目前，對于區別女貞子黃酒炮制前后樣品多用肉眼鑒別，尚未見質譜方面等靈敏度高、快速的鑒別報道。

功效和毒性的變化往往與加工過程中藥材整體化學變化密切相關。受益于分析技術的快速發展，可以直接通過各種分析方法描述化學變化(例如近紅外光譜，核磁共振，和環境電離質譜法等)。中藥往往化學成分復雜，各組分極性、含量差異大。基于數據依賴性采集(DDA)的常規非目標性分析策略，那些低含量化合物經常面臨嚴重干擾難以描述。因此，靈敏靶向的分析方法對于系統表征變得極為重要。

代謝組學作為一種新興的學科，是效仿基因組學和蛋白質組學的研究思想，對生物體內所有代謝物進行定量分析，旨在尋找代謝物與生理病理變化的相對關系的研究方式。分析技術和信息學的最新研究已經將代謝組學用于藥物發現和精準醫學，已成為代謝物綜合分析比較重要的技術手段。植物所含化合物種類多，含量范圍大，目前代謝組學是中藥認證和食品科學的有力工具，可確保安全性，質量和可追溯性。代謝組學分為非目標和目標模式兩種，基于MS的代謝組學方法憑借高靈敏度而在代謝組學中廣泛地使用。非靶向代謝組學通常通過全掃描MS或MS^E測定生物標志物發現到系統代謝組的變化，而靶向模式通過MRM定量測定已知化合物，基于有限標準化合物分析的代謝組學方法限制了LC-MS在植物研究中的應用。

發明內容

本發明提供一種女貞子生品和酒制品的鑒別方法，以實現市售的女貞子生品和酒制品的快速鑒別。具體技術方案如下：

一種女貞子生品和酒制品的鑒別方法，以10-羥基-木樨欖苷二甲酯、新女貞苷或同分異構體、8-demethyl-7-ketologanin、elenolic acid、毛蕊花糖苷、木樨草素中的一種或至少兩種作為標志物；并以橄欖苦苷糖苷配基為內標。

經過驗證，選取上述的每一個化合物單獨作為標志物已經能夠較好地分辨女貞子生品和酒制品。

作為解釋和說明，本領域技術人員可以理解：在知曉上述標志物和內標的基礎之上，已經可以通過本領域常規技術手段對女貞子樣品進行一般的分離檢測，并在此基礎之上經過試驗研究后加以初步判斷。