[發(fā)明專利]一種固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910923026.6 | 申請日： | 2019-09-27 |
| 公開（公告）號： | CN110571005B | 公開（公告）日： | 2021-01-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 伍善廣;陸苑;馮學(xué)珍;蒙華琳;陸玉婷;韋啟球;廖娜 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣西科技大學(xué) |
| 主分類號： | H01F1/00 | 分類號： | H01F1/00;H01F41/00;B01D15/38;C07K1/22 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11340 | 代理人： | 韋莎 |
| 地址： | 545006 廣西壯族自*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 固定 金屬 離子 磁性 脂質(zhì)體 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明公開了一種固定化金屬離子?磁性脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的金屬離子?磁性脂質(zhì)體由磷脂、N?十六烷基亞氨基二乙酸包裹磁性納米四氧化三鐵，組成具有磷脂雙層膜結(jié)構(gòu)的大分子脂質(zhì)體后，并在其表面負(fù)載、固定化過渡金屬離子。與傳統(tǒng)磁性脂質(zhì)體制備方法不同，本發(fā)明采用原位反應(yīng)法制備磁性脂質(zhì)體，主要方法為將FeCl3·6H2O和FeCl2·4H2O溶液在一定溫度、高速攪拌、氮氣保護(hù)下，通過滴加氨水進(jìn)行反應(yīng)，然后加入磷脂?乙醇溶液獲得磁性脂質(zhì)體，再偶聯(lián)過渡金屬離子。本發(fā)明的固定化金屬離子?磁性脂質(zhì)體具備仿細(xì)胞膜親和吸附及金屬離子親和吸附雙重功能，制備方法簡單，穩(wěn)定性好。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及脂質(zhì)體技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)
21世紀(jì)，隨著生命科學(xué)的迅猛發(fā)展，利用新技術(shù)快速、高效地分離生物大分子越來越受到人們的關(guān)注。生物磁分離技術(shù)是一種在傳統(tǒng)磁分離技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新興分離手段，以細(xì)胞、細(xì)菌、核酸和蛋白質(zhì)等生物體為應(yīng)用對象的高效分離技術(shù)，具有高效、快速、簡易等優(yōu)點；其是利用磁性或磁性標(biāo)記生物體在外磁場作用下做定向運動這一特性，實現(xiàn)對目標(biāo)生物體進(jìn)行提取、富集、分離和純化。
目前，固定化金屬離子親和技術(shù)易于制備、成本低，廣泛應(yīng)用于活性蛋白的分離，如分離組氨酸標(biāo)記的重組多肽和重組蛋白質(zhì)、磷酸化蛋白和細(xì)胞色素等。脂質(zhì)體則是將磷脂分散在水中，在一定條件下，自動排列形成的類似于生物膜的磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)。磁性粒子表面包覆一層脂質(zhì)體可以作為一種模擬類生物膜功能粒子，可應(yīng)用于生物磁分離。傳統(tǒng)的活性蛋白的生物磁分離技術(shù)，須對樣品液進(jìn)行過濾、離心等復(fù)雜的前處理操作，分離效率低。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一目的是提供一種固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體，由磷脂、N-烷基亞氨基二乙酸包裹磁性納米四氧化三鐵組成具有磷脂雙層膜結(jié)構(gòu)的大分子脂質(zhì)體后，并在大分子脂質(zhì)體表面負(fù)載、固定化過渡金屬離子。
進(jìn)一步的，所述固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體的磷脂含量為0-300μg/mg，過渡金屬離子含量為0-100μmol/g。
進(jìn)一步的，所述磷脂選自卵磷脂、大豆磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、棕櫚酰油酰磷脂酰乙醇胺中的一種或幾種。
進(jìn)一步的，所述N-烷基亞氨基二乙酸的烷基為C12-C18。
本發(fā)明所述的N-烷基亞氨基二乙酸可由本申請人申請的專利CN201711466648.8一種N-烷基亞氨基二乙酸的制備方法獲得。
本發(fā)明的第二目的是提供上述固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體的制備方法，包括如下步驟：原位反應(yīng)法制備磁性脂質(zhì)體，將FeCl3·6H2O和FeCl2·4H2O溶液在氮氣保護(hù)、高速攪拌下，通過滴加氨水進(jìn)行反應(yīng)，然后加入磷脂-乙醇溶液獲得磁性脂質(zhì)體；再融合N-烷基亞氨基二乙酸、偶聯(lián)過渡金屬離子，即可獲得固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體。
進(jìn)一步的，所述固定化金屬離子-磁性脂質(zhì)體的制備方法，具體包括如下步驟：
(1)以FeCl3·6H2O和FeCl2·4H2O為原料，通過化學(xué)共沉淀法制備磁性Fe3O4納米顆粒；加入磷脂-乙醇溶液進(jìn)行反應(yīng)，得到磁性脂質(zhì)體備用；
(2)磁性脂質(zhì)體偶聯(lián)過渡金屬離子：
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