[發明專利]應用TLC-CMS技術評價紅棗中植物甾醇抗氧化性的方法

有效

• 申請號: 201910914632.1
• 申請日: 2019-09-26
• 公開（公告）號: CN110632237B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 楊衛民;王繼秀;段劉榮;秦永其;杜京旗;張利軍
• 申請（專利權）人: 呂梁學院
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/94;G01N30/95
• 代理公司: 太原科衛專利事務所(普通合伙) 14100
• 代理人: 朱源;武建云

本發明公開了一種應用TLC?CMS技術評價紅棗中植物甾醇抗氧化性的方法，以乙酸乙酯為提取劑，微波超聲波萃取儀輔助處理從紅棗（木棗、駿棗、酸棗）中提取β?谷甾醇，雙波長掃描測定紅棗中β?谷甾醇的含量，質譜對其定性分析，紫外及熒光測定其抗氧化性。經IR檢測，供試樣品與標準品均含有相同官能團：?OH和?CH₃。同等濃度下V_C、V_E、β?谷甾醇的抗氧化性由強到弱為：V_Cβ?谷甾醇V_E。結論：薄層可快速從棗中分離純化出β?谷甾醇，β?谷甾醇表現出良好的抗氧化性，可在化妝品和醫療方面進一步研究。

技術領域

本發明涉及植物甾醇檢測方法，具體為一種應用TLC-CMS技術評價紅棗中植物甾醇抗氧化性的方法。

背景技術

甾醇具有較強的抗氧化特性，可直接猝滅活性氧簇，阻斷不飽和脂肪酸過氧化鏈式反應，改善機體氧化還原平衡，從而緩解炎癥、神經性退化等慢性疾病。還可作為食品抗氧化劑及營養添加劑；也可作為動物生長劑原料，促進動物生長，增進動物健康。

目前，植物甾醇主要從植物油精煉脫臭餾出物中提取。常見的方法有溶劑提取法、分子蒸餾法、超臨界CO₂提取法和酶法等。溶劑提取法成本較低，但是耗時長、提取率低。超臨界CO₂提取法和酶法則存在成本較高，不易推廣的缺點。紅棗中含油量較低，初步計劃先用提取劑浸提。超聲波具有有效破碎植物細胞、利于傳質及促進有效成分溶出但不容易破壞有效物質化學結構的優點，在苦瓜皂苷、番茄紅素、木瓜籽油和石榴籽油以及紫蘇等多種植物有效成分提取方面取得了較好的效果，但對于紅棗中甾醇的含量少有研究。

目前，利用高效液相色譜（HPLC）、高效氣相色譜（GC）、薄層（TLC）對甾醇的研究很多，尤其是GC，但TLC-CMS聯用仍無人采用，應用Plate ExpressTM技術可直接從TLC 薄層板上獲取質譜圖，其優點是不經過樣品前處理，可快速從復雜混合物中獲得目標物分子質量信息，并對其進行鑒定。

植物甾醇是一種結構上與動物甾醇相似而功能完全不同的天然的植物活性成分，食源性甾醇具有抗氧化的功效，能夠作為表面活性劑。可以保持皮膚表面水分，促進皮膚新陳代謝、抑制皮膚炎癥，可防日曬紅斑、皮膚老化，還有生發、養發之功效。本方法致力于紅棗中的甾醇的提取，并分析其抗氧化性。

發明內容

本發明目的是提供一種應用TLC-CMS技術評價紅棗中植物甾醇抗氧化性的方法，本方法主要是結合微波超聲技術從紅棗（木棗、駿棗、酸棗、木棗核、駿棗核、酸棗核）中提取β-谷甾醇，通過TLC-CMS聯用技術對其進行抗氧化性測定。

本發明是采用如下技術方案實現的：

一種應用TLC-CMS技術評價紅棗中植物甾醇抗氧化性的方法，包括如下步驟：

（1）、微波超聲技術粗提甾醇

材料的預處理：以紅棗仁或者紅棗核為原料，清洗后55℃烘干，粉碎過80目篩備用。

樣品的制備：以乙酸乙酯為提取劑，稱取紅棗仁粉或紅棗核粉于容器中，料液比1:15；微波超聲波萃取時間為40min、萃取功率為400W；萃取后4000r/min離心10min，過濾3次，濃縮，用氯仿定容。

標準溶劑的制備：取標準β-谷甾醇，色譜甲醇定溶，配成1mg/ml的標準溶劑待用。

（2）、TLC分離純化甾醇

點樣：用微量進樣器吸取50μL β-谷甾醇標準品溶液，置于全自動點樣機上，設置點樣參數：點樣間距10mm、點樣寬度8mm、點樣數目3、點樣量分別為5μL、10μL、15μL、點樣速度5s/μL，在硅膠板上進行點樣，再吸取10μL供試品溶液，點樣10μL。