[發(fā)明專(zhuān)利]一種化學(xué)發(fā)光免疫分析儀用底物液及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910880472.3
• 申請(qǐng)日: 2019-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110568183A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊帆;許建成;任文波;李志凱;田永帥;楊鋒斌
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 濰坊市康華生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/531
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/531;G01N21/76
• 代理公司: 37266 濰坊中潤(rùn)泰專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙)
• 代理人: 田友亮

本發(fā)明公開(kāi)了一種化學(xué)發(fā)光免疫分析儀用底物液及其制備方法，本發(fā)明適用于雅培、康華等國(guó)內(nèi)外全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，具有成本低廉，與雅培底物液對(duì)比上機(jī)實(shí)驗(yàn)，本技術(shù)方案信噪比更高、發(fā)光強(qiáng)度更大、測(cè)值重復(fù)性?xún)?yōu)于雅培底物液，可完全有效替代市場(chǎng)上廣泛銷(xiāo)售及價(jià)格昂貴的雅培底物液，從而有效解決國(guó)內(nèi)醫(yī)院及廠家過(guò)度依賴(lài)進(jìn)口的問(wèn)題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)領(lǐng)域。

具體地說(shuō)，是涉及一種化學(xué)發(fā)光免疫分析儀用底物液及其制備方法。

背景技術(shù)

20世紀(jì)70年代，歐美發(fā)達(dá)國(guó)家醫(yī)學(xué)界出現(xiàn)了用化學(xué)發(fā)光免疫分析方法檢測(cè)人體疾病，該技術(shù)結(jié)合了化學(xué)發(fā)光方法與免疫反應(yīng)，具有免疫反應(yīng)的特異性，并且是非放射性標(biāo)記，無(wú)放射性污染，是體外診斷行業(yè)的最新檢測(cè)技術(shù)，廣泛受?chē)?guó)內(nèi)外各大三甲醫(yī)院檢驗(yàn)科的青睞，應(yīng)用于心臟標(biāo)記物、腫瘤標(biāo)記物、甲狀腺功能、代謝、性激素等項(xiàng)目的檢測(cè)，目前國(guó)外已經(jīng)普及并發(fā)展成熟，國(guó)內(nèi)還處于起步階段，發(fā)展前景廣闊，其中，吖啶酯標(biāo)記的磁微粒化學(xué)發(fā)光又是該技術(shù)的翹楚。在堿性H₂O₂溶液中，吖啶酯分子受到過(guò)氧化氫離子進(jìn)攻時(shí)，生成不穩(wěn)定的二氧乙烷，此二氧乙烷分解為CO₂和電子激發(fā)態(tài)的N-甲基吖啶酮，當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)發(fā)出最大發(fā)射波長(zhǎng)為430nm的光子。這類(lèi)化合物從發(fā)光的機(jī)理來(lái)說(shuō)特點(diǎn)是:①發(fā)光反應(yīng)中在形成電子激發(fā)態(tài)中間體之前，聯(lián)結(jié)于吖啶環(huán)上的不發(fā)光的取代基部分從吖啶環(huán)上脫離開(kāi)來(lái)，即未發(fā)光部分與發(fā)光部分分離，因而其發(fā)光效率基本不受取代基結(jié)構(gòu)的影響。②吖啶酯或吖啶磺酰胺類(lèi)化合物化學(xué)發(fā)光不需要催化劑，在有H₂O₂的稀堿性溶液中即能發(fā)光。因此應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)具有許多優(yōu)越性。優(yōu)點(diǎn)主要有:①背景發(fā)光低，信噪比高；②發(fā)光反應(yīng)干擾因素少；③光釋放快速集中、發(fā)光效率高、發(fā)光強(qiáng)度大；④易于與蛋白質(zhì)聯(lián)結(jié)且聯(lián)結(jié)后光子產(chǎn)率不減少；⑤標(biāo)記物穩(wěn)定(在2-8℃下可保存數(shù)月之久)。因此吖啶酯或吖啶磺酰胺是一類(lèi)非常有效、非常好的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物。

目前，國(guó)內(nèi)外廠家熱衷于自主研發(fā)化學(xué)發(fā)光底物液并配套自有產(chǎn)品的使用。國(guó)外以雅培底物液為代表,國(guó)內(nèi)如深圳菲鵬、蘇州長(zhǎng)光華醫(yī)、深圳亞輝龍，威海威高、廈門(mén)萬(wàn)泰凱瑞、南京迪格諾斯等廠家均開(kāi)發(fā)自主底物，但普遍信噪比及重復(fù)性不佳，雅培底物液為國(guó)際公認(rèn)較好的產(chǎn)品，但價(jià)格昂貴。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述傳統(tǒng)技術(shù)的不足之處，提供一種化學(xué)發(fā)光免疫分析儀用底物液及其制備方法，成本低廉，信噪比及重復(fù)性?xún)?yōu)異，滿足醫(yī)療領(lǐng)域的要求。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)措施來(lái)達(dá)到的：

一種化學(xué)發(fā)光免疫分析儀用底物液，包括預(yù)激發(fā)液和激發(fā)液；

所述預(yù)激發(fā)液包括以下組分：

氟硼酸：0.05M-0.2M；

H₂0₂：0.05％-0.2％；

EDTA：5mM-10mM；

PC-300：0.05％-0.1％；

所述激發(fā)液包括以下組分：

NaOH：0.1M-0.35M；

NP-10：0.5％-2.5％；

DMF：0.1％-0.25％；

Krovin600：0.05％-1％。

所述預(yù)激發(fā)液中氟硼酸主要用于調(diào)整該體系的PH值，使其具有一定的酸性，H₂O₂具有強(qiáng)氧化性，作為氧化劑使用。所述預(yù)激發(fā)液的主要作用是將標(biāo)記物從復(fù)合物上裂解下來(lái)，并提供一個(gè)酸性的環(huán)境，防止反應(yīng)過(guò)早發(fā)生。