[發(fā)明專利]一種合成培養(yǎng)基及其制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910875331.2
• 申請(qǐng)日: 2019-09-17
• 公開（公告）號(hào): CN110551660B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃明志;陳騰飛;李敏超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P19/48;C12R1/01
• 代理公司: 上海碩力知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31251
• 代理人: 郭桂峰

本發(fā)明公開了一種合成培養(yǎng)基及其制備和用途，其特征在于，所述合成培養(yǎng)基包含如下成分及其質(zhì)量濃度：葡萄糖·H₂O 10～30g/L、木糖0.2～1.0g/L、硫酸銨3～10g/L、硝酸鈉2～5g/L、氯化鉀0.2～0.8g/L、磷酸二氫鉀1.0～3.0g/L、硫酸亞鐵0.02～0.08g/L、硫酸鎂0.03～0.06g/L、氯化鈷0.005～0.02g/L、碳酸鈣2～10g/L、苯丙氨酸0.01～0.05g/L、維生素VB12 0.001～0.01g/L、維生素VB3 0.001～0.02g/L、生物素0.001～0.03g/L、甜菜堿0.01～0.1g/L，剩余余量為水。采用本發(fā)明的新型培養(yǎng)基培養(yǎng)小單胞菌，對(duì)小單胞菌發(fā)酵合成次級(jí)代謝產(chǎn)物的機(jī)理研究及工業(yè)化生產(chǎn)慶大霉素C1a具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種合成培養(yǎng)基及其制備方法和用途。

背景技術(shù)

慶大霉素C1a是國內(nèi)首創(chuàng)、具備獨(dú)立知識(shí)產(chǎn)權(quán)Ⅰ類的半合成新藥衣替米星的母核前體。傳統(tǒng)制備C1a的方法是采用樹脂分離技術(shù)從多組分慶大霉素中提取C1a單組份，由于各組分之間結(jié)構(gòu)類似，物理化學(xué)性質(zhì)相近，導(dǎo)致了提取成本居高不下，市場上高純度C1a售價(jià)居高不下。慶大霉素C1a作為慶大霉素多組分中的一種，工業(yè)發(fā)酵過程中采用大量的有機(jī)氮源、碳源等復(fù)合物進(jìn)而導(dǎo)致其產(chǎn)物合成機(jī)理與發(fā)酵條件之間關(guān)系無法準(zhǔn)確判定。

盡管國內(nèi)外文獻(xiàn)中針對(duì)慶大霉素合成培養(yǎng)進(jìn)行一些報(bào)道，但是，直接用于慶大霉素C1a發(fā)酵其產(chǎn)物合成含量非常低。

因此，需要開發(fā)出一種適用于慶大霉素C1a的專屬合成培養(yǎng)基提高慶大霉素C1a發(fā)酵其產(chǎn)物合成含量。

培養(yǎng)基一般包括復(fù)合培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。復(fù)合培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果較好，但其缺點(diǎn)是成分復(fù)雜，原料質(zhì)量穩(wěn)定性較差，造成生產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性也較差。目前本領(lǐng)域中，慶大霉素C1a生產(chǎn)用的都是復(fù)合培養(yǎng)基，雖然產(chǎn)量基本符合要求，但是目前本領(lǐng)域中尚沒有應(yīng)用合成培養(yǎng)基生產(chǎn)慶大霉素C1a的報(bào)道。

因此，為了研究發(fā)酵條件與產(chǎn)物合成代謝機(jī)理的關(guān)系，開發(fā)一種適用于慶大霉素C1a的專屬合成培養(yǎng)基具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)中慶大霉素C1a發(fā)酵其產(chǎn)物合成含量非常低的問題，本發(fā)明提供了一種適用于培養(yǎng)絳紅小單胞菌或棘孢小單胞菌，使之高效生產(chǎn)慶大霉素C1a的合成培養(yǎng)基配方。本發(fā)明的培養(yǎng)基，適合于小單胞菌的生長，且可大大地提高慶大霉素C1a的產(chǎn)量。

本發(fā)明提供的一種合成培養(yǎng)基包含如下成分及其質(zhì)量濃度：葡萄糖·H₂O 10～30g/L、木糖0.2～1.0g/L、硫酸銨3～10g/L、硝酸鈉2～5g/L、氯化鉀0.2～0.8g/L、磷酸二氫鉀1.0～3.0g/L、硫酸亞鐵0.02～0.08g/L、硫酸鎂0.03～0.06g/L、氯化鈷0.005～0.02g/L、碳酸鈣2～10g/L、苯丙氨酸0.01～0.05g/L、維生素VB120.001～0.01g/L、維生素VB3

0.001～0.02g/L、生物素0.001～0.03g/L、甜菜堿0.01～0.1g/L，剩余余量為水。

進(jìn)一步地，所述合成培養(yǎng)基的成分的質(zhì)量濃度優(yōu)選為：葡萄糖·H₂O20～28g/L、木糖0.4～0.8g/L、硫酸銨3～5g/L、硝酸鈉2～3g/L、氯化鉀0.4～0.6g/L、磷酸二氫鉀1.5～2.5g/L、硫酸亞鐵0.04～0.06g/L、硫酸鎂0.04～0.05g/L、氯化鈷0.01～0.015g/L、碳酸鈣4～8g/L、苯丙氨酸0.03～0.05g/L、維生素VB120.005～0.008g/L、維生素VB30.005～0.008g/L、生物素0.01～0.02g/L、甜菜堿0.03～0.08g/L，剩余余量為水。