[發明專利]一種通過電化學雙酶傳感器檢測毛油中PC含量的方法

有效

• 申請號: 201910873460.8
• 申請日: 2019-09-17
• 公開（公告）號: CN110455885A
• 公開（公告）日: 2019-11-15
• 發明（設計）人: 于殿宇;于長華;王旭;李丹;岳瑩雪;江連洲;王立琦;吳非;潘明喆
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/327
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種通過電化學電化學雙酶傳感器檢測毛油中PC含量的方法，其特征在于采用電化學雙酶傳感器對毛油中的PC進行檢測的方法通過以下步驟實現：

具體實施方式一：

用自制的電化學雙酶傳感器檢測毛油中PC含量的方法通過以下步驟實現：步驟一：自制的電化學雙酶傳感器。取0.15g殼聚糖(CS)粉末置于250mL的燒瓶中，加入濃度為0.3％的CS/乙酸透明溶液，用電動攪拌器攪拌30min，促使CS的充分溶解。2.5mg二氧化錫(SnO₂)和5mg多壁碳納米管(MWCNTs)粉的混合物，加入到5mL的CS/乙酸透明溶液中，超聲處理60min，得到MWCNTs-SnO₂-CS納米復合物，于4℃貯存備用；步驟二：制備含有100mg·L-1PC的PBS緩沖溶液為測試底液。將2.5U辣根過氧化物酶溶液滴涂到GCE表面，置于4℃下靜置干燥，待表面成薄膜狀時滴加5μL戊二醛于電極表面，37℃下交聯30min，然后用PBS緩沖液清洗電極表面。GCE上滴加10μL膽堿氧化酶，待表面成薄膜狀時滴加5μL戊二醛于電極表面，37℃下交聯30min，然后利用PBS緩沖液清洗電極的表面，N₂吹干后得到雙酶GCE，將其儲存在4℃干燥的環境下備用；步驟三：在測試底液中，PC經PLD處理一段時間后獲得膽堿，膽堿在ChOx催化作用下生成H₂O₂，H₂O₂再被固定的HRP還原，進而氧化態的HRP與溶液中電子媒介體硫堇之間發生電子轉移，最終TH+在電極表面得到電子被還原，從而產生了還原電流，說明了雙酶GCE對PC具有明顯的電化學響應效果。

2.根據權利要求1所述的一種通過電化學雙酶傳感器檢測毛油中PC含量的方法，其特征在于步驟二中CS/乙酸透明溶液的濃度為1％。

3.根據權利要求1所述的一種通過電化學雙酶傳感器檢測毛油中PC含量的方法，其特征在于步驟二中交聯的溫度為25℃。

4.根據權利要求1所述的一種通過電化學雙酶傳感器檢測毛油中PC含量的方法，其特征在于步驟二中電化學交聯時間為60min。